用紫外光源通過分光光度技術(shù)對物質(zhì)進(jìn)行測定的方法叫作紫外分光光度法,所使用的儀器叫作紫外分光光度計。紫外分光光度計主要結(jié)構(gòu)包括:光源、色散系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理器、自動記錄器、顯示器等部件。
1)、光源:常見的電源為鎢燈或者氘燈。
鎢燈發(fā)射波長為325~2500nm,適宜使用波長為320~1000nm,因此,鎢燈也可作近紅外光源。鎢燈工作電壓是12V,也可使用12V直流電源供電,電源電壓的微小波動都會引起鎢光強度的很大變化,使用過程中必須穩(wěn)壓電源供電,鎢燈工作時間為10000小時以上。
氘燈發(fā)射波長為190~400nm,適宜使用波長為190~360nm,使用中也需提供穩(wěn)壓電源,氘燈的使用壽命:國產(chǎn)的一般為500~800小時,進(jìn)口的一般為1000小時,少數(shù)的能達(dá)到2000小時。
2)、單色器
單色器是將連續(xù)光譜分解成單色光,并能夠準(zhǔn)確發(fā)射目標(biāo)所需要的單一波長的光,是整個儀器關(guān)鍵的部件。單色器由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成,關(guān)鍵部件為色散元件,常用為棱鏡、光柵,或者是兩者的組合?,F(xiàn)階段,光柵以及組合使用頻率較高。
棱鏡單色器由玻璃或石英制成,玻璃棱鏡存在吸收紫外光,不宜用于紫外光區(qū)。石英棱鏡工作波長為185~4000nm,波長越短,色散程度越好,越趨向長波,色散程度越差。石英棱鏡在紫外光區(qū)可達(dá)到0.2nm,而在長波段,只能達(dá)到5nm。光柵單色器為一系列等寬、等距離的平行狹縫,光柵單色器的分辨率到0.2nm且波長范圍比棱鏡單色器范圍寬。
3)、吸收池
吸收池,又稱比色皿,用于盛裝待測液并決定待測溶液透光液層厚度的器皿,常為長方體,也有圓形或其他形狀。底面和兩側(cè)為毛玻璃,另外兩側(cè)為光學(xué)透明面。比色皿材質(zhì)為石英,吸收池規(guī)格包括:0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。
4)、檢測器
將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栄b置稱為檢測器。測量吸光度并不是測量透過吸收池的光強度,而是將光強度轉(zhuǎn)換成電流進(jìn)行測量,此種光電轉(zhuǎn)換器件稱為檢測器,又叫接受器。常用的檢測器有光電池、光電管、光電倍增管及光電二極管陣列檢測器等。目前,分光光度計中一般采用光電倍增管作為檢測器。光電二極管陣列檢測器是紫外可見分光光度計檢測的一個重要進(jìn)展,代表了新的發(fā)展水平。
5)、信號顯示系統(tǒng)
將檢測器輸出的信號放大,并顯示出來的裝置。舊型號分光光度計采用檢流計、微安表作顯示裝置,直接讀出吸光度或透光率;現(xiàn)階段,多采用數(shù)字電壓表等顯示,并用記錄儀直接繪制出吸收(或透射)曲線,并配有計算機數(shù)據(jù)處理器等。
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