微生物包括:細菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、顯微藻類等在內(nèi)的一大類生物群體,它個體微小,與人類關(guān)系密切。涵蓋了有益跟有害的眾多種類,廣泛涉及食品、醫(yī)藥、工農(nóng)業(yè)、環(huán)保、體育等諸多領(lǐng)域。在中國大陸地區(qū)及中國臺灣的教科書中,均將微生物劃分為以下8大類:細菌、病毒、真菌、放線菌、立克次氏體、支原體、衣原體、螺旋體。有些微生物是肉眼可以看見的,像屬于真菌的蘑菇、靈芝、香菇等。還有微生物是一類由核酸和蛋白質(zhì)等少數(shù)幾種成分組成的"非細胞生物",但是它的生存必須依賴于活細胞。
在微生物實驗過程中,會發(fā)生很多小問題,現(xiàn)在對它們進行部分匯總,希望能給大家?guī)韼椭?br />
1.無菌操作:培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后,用經(jīng)過滅菌的接種工具在無菌條件下接種含菌材料于培養(yǎng)基上,這一操作稱為無菌操作。
2.培養(yǎng)基:是人工配制的能滿足微生物生長繁殖和積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。
3.假菌絲:酵母生長旺盛時,出芽形成的芽細胞尚未脫離母細胞又長出了新芽,容易形成成串的細胞。如果各細胞之間連接處面積小于細胞直徑,形成的這種藕節(jié)狀的細胞串稱為假菌絲。
4.大腸菌群:大腸菌群系指一群在電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)37℃、24h能發(fā)酵乳糖,產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。
5.細菌菌落總數(shù):指被檢樣品通過一定的處理方法,培養(yǎng)一段時間后,每毫升或每毫克樣品中所含細菌的菌落數(shù)。由于經(jīng)過適當稀釋的樣品中每個細胞可形成一個單菌落,所以菌落數(shù)即是細菌活菌總數(shù)。 無菌吸管上端塞入棉花的主要目的是為了防止污染菌液吸入口中 。
6.稀釋平板計數(shù)時,細菌,放線菌,真菌的計數(shù)標準是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個的稀釋度進行計數(shù) 為了滿足微生物對微量元素的需要,配制培養(yǎng)基所用的水建議使用自來水 實驗室通常使用血球計數(shù)板測酵母菌的總菌數(shù)或霉菌的孢子數(shù) 。
7.浸油的油鏡鏡頭可用軟的擦鏡紙擦凈。
8.稀釋平板計數(shù)通常采用的是十倍稀釋法 。
9.使用手提滅菌鍋滅菌后,不可直接打開排氣閥排氣 鏡臺測微尺每小格的實際長度是10微米。
10.用血球計數(shù)板計數(shù)時,按對角線方位,數(shù)左上、左下、右上、右下的4個中方格計數(shù) 。
11.測微生物的細胞大小時,需要校正的是目鏡測微尺每格的實際長度。
12.霉菌中有足細胞的霉菌為曲霉。
13.明膠液化實驗,明膠的水解是由于細菌所產(chǎn)生的明膠酶(亦稱類蛋白水解酶)的作用。
14.大腸桿菌為革蘭氏陰性菌,革蘭氏染色后菌體呈紅色;枯草芽孢桿菌和八疊球菌為革蘭氏陽性菌,革蘭氏染色后菌體呈紫色。
15.培養(yǎng)基的pH值在加熱滅菌后會下降0.3~0.4,因此配制時的pH值要比要求的略高一些。
16.鏡臺測微尺每小格的實際長度是10微米。
17.實驗室做固體培養(yǎng)基,常加2%的瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時,瓊脂加入量通常是1%。
18.血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)的面積是1mm2。
19.檢查乳品和飲料是否含有大腸桿菌(E.coli)等腸道細菌,可采用伊紅美蘭培養(yǎng)基,在這種培養(yǎng)基平板上能分解乳糖產(chǎn)酸的菌_(大腸菌群)會形成具有金屬光澤的紫黑色小菌落。
20.測定酵母細胞出芽率時,芽體的標準是小于細胞的1/2,如果視野中的芽體數(shù)為15個,細胞數(shù)為60個,則出芽率為25%。
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