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色譜柱清洗方法

閱讀：679 發(fā)布時(shí)間：2017-8-18

　　吸附的主要原因

　　反相硅膠柱填充介質(zhì)(固定相)與樣品間常常會(huì)發(fā)生下列吸附現(xiàn)象：

　　(1) 殘存硅醇基與堿性物質(zhì)間的離子吸附；(2) 硅膠表面的金屬雜質(zhì)與金屬配位物質(zhì)間的吸附；

　　(3) 疏水性*的物質(zhì)在柱中的蓄積。以上現(xiàn)象，會(huì)引起反相色譜柱柱效下降、拖尾、重復(fù)性不良等狀況的發(fā)生

　　清洗方法

　　1、疏水性物質(zhì)的去除:使用有機(jī)溶劑(乙腈、甲醇、乙腈與THF的混合溶劑)進(jìn)行清洗。考慮樣品成分對于有機(jī)溶劑的溶解性，選用比淋洗液濃度高的有機(jī)溶劑、或選用極性較低的有機(jī)溶劑進(jìn)行過柱清洗。這種情況下，有必要注意淋洗液中鹽的析出現(xiàn)象。

　　2、堿性物質(zhì)(金屬配位物質(zhì))的去除:使用酸性水溶液與有機(jī)溶劑的混合液(0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、甲醇的混合液)進(jìn)行過柱清洗。

　　*一般來說，清洗時(shí)間可選擇為過柱5-10個(gè)柱體積便可。

　　在附吸成分其吸附力*時(shí)，即使進(jìn)行過清洗，柱性能也有可能得

　　不到恢復(fù)。另外，請充分考慮淋洗液的pH值，以避免損壞色譜柱。

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