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病毒核酸檢測(cè)的原理,簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)病毒是一種僅含有RNA的病毒,其基因序列具有性,通過(guò)一種基因測(cè)序儀器完成對(duì)病毒全基因組序列的解析,對(duì)每一個(gè)疑似患者,測(cè)出其病毒基因序列病毒基因序列對(duì)比,就能知道該患者是否病毒。該方法的結(jié)果準(zhǔn)確度高。
基因測(cè)序行業(yè),按照業(yè)務(wù)范圍可分為四大類(見(jiàn)下圖),下面作詳細(xì)介紹:
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))設(shè)備,是PCR實(shí)驗(yàn)室中要放置的整套儀器。酶是基因測(cè)序過(guò)程中*的材料。PCR設(shè)備包括移液器組(可以移0.5ul-1000ul,1ul就是1毫升的千分之一)、TGL-16.5M 臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(參考數(shù)據(jù):/lixinji/TGL-16.5M.html)、基因分析儀、超純水裝置、熒光定量PCR儀、恒溫器等,這些儀器都是精密儀器,其性能對(duì)測(cè)序結(jié)果至關(guān)重要。
臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)圖片
臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)是提取病毒RNA核酸的配套儀器,協(xié)和醫(yī)院近期發(fā)布了病毒操作指南,供有條件的實(shí)驗(yàn)室參考,操作人員在進(jìn)入試劑配置區(qū)或者單獨(dú)的潔凈實(shí)驗(yàn)室需要遵循實(shí)驗(yàn)流程。
1、試劑區(qū)準(zhǔn)備:洗液AW1、洗液AW2和Carrier RNA
根據(jù)說(shuō)明說(shuō)要求,在AW1中加入無(wú)水乙醇130mL,在AW2中加入無(wú)水乙醇160mL,計(jì)入無(wú)水乙醇后及時(shí)做好標(biāo)記,在310μg的Carrier RNA中加入310μL AVE,并顛倒混勻使Carrier RNA充分溶解,就此完成洗液AW1、洗液AW2和Carrier RNA配置,而后通過(guò)傳遞窗傳送到樣本處理區(qū),或者由專人送到核酸提取實(shí)驗(yàn)室中。
2、樣本的裂解
用1.5ml的無(wú)菌EP管,移液器移取560μl AVL裂解液,加入5.6μl Carrier RNA,加入140μl的已滅活的待提取核酸的待測(cè)樣本,渦旋振蕩15s,室溫靜止10min。將上述EP管放入離心機(jī)內(nèi)瞬時(shí)離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產(chǎn)物,防止污染。裂解完成后,加入560μl無(wú)水乙醇,振蕩混勻15s,將上述EP管放入離心機(jī)內(nèi)瞬時(shí)離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產(chǎn)物,防止污染。
向離心柱加入裂解產(chǎn)物630μl,8000轉(zhuǎn)離心1min,若離心機(jī)在生物安全柜之外,每次使用都需進(jìn)行外表面消毒。更換新廢液收集管,要從離心機(jī)中小心取出離心柱,將上層離心柱轉(zhuǎn)移到新收集管中,繼續(xù)將剩余裂解產(chǎn)物630μl加入離心柱中,若樣本體積大于140μl時(shí)需重復(fù)此步驟,直到全部裂解產(chǎn)物都過(guò)柱離心,8000轉(zhuǎn)離心1min,小心將離心柱轉(zhuǎn)移到新的收集管中。
取500μl AW1加入離心柱中(注意,此處加樣操作時(shí)務(wù)必將移液器吸頭接觸離心柱內(nèi)壁緩慢加樣),8000轉(zhuǎn)離心1min。小心取出離心柱,更換新的收集管。
取500μl AW2加入離心柱中,14000轉(zhuǎn)離心3min,小心取出離心柱,更換新的離心柱上端收集管,置于離心機(jī)中使用大轉(zhuǎn)速離心1min,以確保將AW2中的殘液*離心干凈。
取無(wú)菌1.5mlEP管收集核酸,將離心柱上端小心放入1.5mlEP管中,取40-60μl的洗脫液AVE加入到離心柱中(注意:洗脫液應(yīng)盡量全部覆蓋住離心柱膜),用EP管管蓋蓋住離心柱,使用無(wú)菌剪刀剪去原離心柱管蓋。
室溫靜止1min,將其放入離心機(jī)中8000轉(zhuǎn)離心1min,回收核酸。丟棄離心柱,EP管中即為獲取的提取核酸,做好標(biāo)記與登記。
近日,國(guó)家*再次應(yīng)急批準(zhǔn)1個(gè)病毒核酸快速檢測(cè)產(chǎn)品,進(jìn)一步服務(wù)于疫情防控需疫情發(fā)生以來(lái),國(guó)家*已經(jīng)應(yīng)急批準(zhǔn)了23個(gè)*檢測(cè)產(chǎn)品,其中病毒核酸檢測(cè)試劑15個(gè),抗體檢測(cè)試劑8個(gè)。
為了讓更多更快速更準(zhǔn)確的試劑產(chǎn)出,各大企業(yè)都在抓緊時(shí)間擴(kuò)大生產(chǎn),上海盧湘儀推出GL-21M高速冷凍離心機(jī)(參考數(shù)據(jù):/lixinji/GL-21M.html)為試劑生產(chǎn)商助上一臂之力。
高速冷凍離心機(jī)圖片
GL-21M高速冷凍離心機(jī)是一款專門針對(duì)轉(zhuǎn)速高需求的客戶設(shè)計(jì),可廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、生物工程、基因工程、制藥、高校等領(lǐng)域的高速冷凍離心機(jī),該機(jī)器采用食用級(jí)硅橡膠整體式密封圈,符合GMP認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn),為保證試劑安全有效提供保障。
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