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實(shí)驗(yàn)室里大家都埋頭做實(shí)驗(yàn),可為什么老板每次都罵我們,你都快 30 的人了這也不會(huì)那也不會(huì),白長(zhǎng)這么大了,栽培了你那么多年到頭來啥也指望不上。對(duì)此,我深感委屈,那個(gè)細(xì)胞我養(yǎng)了那么久,它還是那樣衣來伸手飯來張口,我有怪過誰么?
首先,這么大的細(xì)胞了,除了要自己學(xué)會(huì)傳代之外,鄙人對(duì)你們還有更高的要求,你該學(xué)會(huì)自己做實(shí)驗(yàn)了。
非常好,你能區(qū)分什么時(shí)候需要構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株嗎?
細(xì)胞:需要構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株的,有這些類型:
1. 長(zhǎng)期在目的細(xì)胞中研究基因功能;
2. 部分蛋白半衰期極長(zhǎng),瞬時(shí) RNA 只能干擾表達(dá),無法去除已經(jīng)表達(dá)的目的蛋白,想要實(shí)現(xiàn)更好的基因干擾效果;
3. 想要實(shí)驗(yàn)更,篩選拷貝數(shù)適量的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究;
4. 需要用誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的,主要是一些致死基因或者是需要時(shí)空表達(dá)的;
5. 需要用細(xì)胞做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的,比如裸鼠成瘤等。
以下實(shí)驗(yàn)就不需要構(gòu)建穩(wěn)定株:
1. 希望迅速觀察目的基因過表達(dá)或者干擾效果;
2. 2~4 天的瞬時(shí)表達(dá)已經(jīng)可以達(dá)到具體的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模热鐧z測(cè)兩個(gè)外源轉(zhuǎn)染的目的蛋白之間的相互作用;
3. 細(xì)胞個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響。
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