一般提取胎牛血清白蛋白，我們常使用加熱法。在今天的技術(shù)咨詢中，上海恒遠(yuǎn)生物為您主要介紹方法步驟及所需材料。下面一起來(lái)看看如何靈活運(yùn)用加熱法提取胎牛血清白蛋白？
一、所需材料
胎牛血清取近郊屠宰場(chǎng)，以檸檬酸三鈉為抗凝劑，血液采集后隨即分離出血漿備用。需要的試劑有血清白蛋白；溴甲酚氯；醋酸纖維素薄膜，其余試劑均為分析純。提取胎牛血清白蛋白需要準(zhǔn)備 LG-6型大容量冷凍離心機(jī)，DF-C型電泳儀，UV-754型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，PHS-2型酸度計(jì)。
二、具體方法
白蛋白含量測(cè)定 采用溴甲酚氯法，以胎牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn). 白蛋白純度的測(cè)定 采用醋酸纖維素薄膜電泳法。吸光度值的測(cè)定 用分光光度計(jì)直接測(cè)定蛋白質(zhì)溶液在波長(zhǎng)為403 nm處的光吸收值，然后折算成濃度為10 g/L時(shí)牛血清白蛋白的光吸收值，用A403表示。
胎牛血清白蛋白的生產(chǎn)工藝 新鮮抗凝牛血用LC-6型大容量離心機(jī)(3 000 r/min×30 min)離心分離出血漿，加一定量的蒸餾水稀釋，再加入適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑和蛋白沉淀劑，然后按下述方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)處理：
1.不同pH值溶液對(duì)白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在其它條件固定的情況下，試驗(yàn)不同pH值對(duì)白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
2.不同加熱保溫時(shí)間對(duì)白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在選定的pH值和其它條件固定的情況下，試驗(yàn)不同加熱保溫時(shí)間對(duì)白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
3.不同稀釋倍數(shù)對(duì)白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在選定的pH值和保溫時(shí)間及其它條件固定的情況下，試驗(yàn)不同稀釋倍數(shù)對(duì)白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
4.不同加熱溫度對(duì)白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在其它條件選定的情況下，試驗(yàn)不同加熱溫度對(duì)白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
會(huì)員1.png)
