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常用的生物試劑

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1.蛋白酶K:

能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白。再尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,*反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。

 

2.SDS:

      十二烷基硫酸鈉. 溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀

 

3.IPTG

      異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等. IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定

 

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