本試劑盒用于測(cè)定微生物樣本中ATP酶(ATPase)含量。
 

　　實(shí)驗(yàn)原理
 

　　本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人ATP酶(ATPase)水平。用純化的人ATP酶(ATPase)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入ATP酶(ATPase)，再與HRP標(biāo)記的ATP酶(ATPase)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ATP酶(ATPase)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人ATP酶(ATPase)濃度。
 

　　微生物ATP酶(ATPase)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成
 

　　130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
 

　　2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(2000nmol/L)0.5ml×1瓶
 

　　3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶
 

　　4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份
 

　　5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
 

　　6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)
 

　　標(biāo)本要求
 

　　1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
 

　　2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。微生物ATP(ATPase)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
 

　　1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
 

　　1000nmol/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 

　　500nmol/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 

　　250nmol/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 

　　125nmol/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 

　　62.5nmol/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液