本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
 

　　雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒 試劑盒名稱(chēng)】雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒 試劑盒用途】定量雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)的含量
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理】
 

　　本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標(biāo)工作液，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)濃度呈正相關(guān)，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計(jì)算樣本中微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)含量。
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
 

　　1、37℃恒溫箱
 

　　標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
 

　　精密移液器及一次性吸頭
 

　　蒸餾水
 

　　一次性試管
 

　　吸水紙
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟】
 

　　1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
 

　　2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
 

　　3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL，再加*40μL(即樣本稀釋5倍)；空白對(duì)照孔不加。
 

　　4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
 

　　5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板)。
 

　　6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對(duì)照孔不加。
 

　　7、溫育：重復(fù)4的操作。
 

　　8、洗板：重復(fù)5的操作。
 

　　9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。
 

　　10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
 

　　11、測(cè)定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。
 

　　12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒 樣本要求】
 

　　1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3)，因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑。
 

　　2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
 

　　3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)】
 

　　1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
 

　　2、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
 

　　3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè)，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
 

　　4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
 

　　5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml，超過(guò)此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(0.1-200ng/ml范圍內(nèi))，乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
 

　　6、若顯色過(guò)淺，可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。
 

　　7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、*和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。
 

　　8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用。
 

　　9、底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒操作程序總結(jié)】
 

　　1.準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
 

　　2.加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘
 

　　3.洗板4次，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘
 

　　4.洗板4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘
 

　　5.加入終止液
 

　　6.15分鐘之內(nèi)讀OD值
 

　　計(jì)算
 

　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)范圍】
 

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　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒規(guī)格】
 

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　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒貯藏】
 

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　　【雞微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA檢測(cè)試劑盒有效期】
 

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