影響到培養(yǎng)基質(zhì)量的因素有很多,出去保存、運(yùn)輸、溫度等問(wèn)題中,污染參數(shù)也是一個(gè)決定質(zhì)量的重要因素。每一批在使用之前必須仔細(xì)檢查污染情況。
上海古朵生物建議:
將一批制備的在室溫放3天以檢查污染情況?;蛘邚囊慌鷾y(cè)試中拿出兩個(gè)放在孵箱內(nèi)37°C孵育24小時(shí)。經(jīng)必要的孵育后,檢查有無(wú)生長(zhǎng)。假如有生長(zhǎng),從同一批制備中再拿出兩個(gè),重復(fù)上述過(guò)程一次。假如再次出現(xiàn)污染,表明制備的這一批有污染。建議當(dāng)一批污染超過(guò)10%應(yīng)棄往。
生產(chǎn)率(PR)您了解過(guò)嗎?
PR=測(cè)試板上的克隆數(shù)×稀釋倍數(shù)
質(zhì)控板上的克隆數(shù)×稀釋倍數(shù)
這種方法是對(duì)Miles和Misra技術(shù)的改進(jìn)。將測(cè)試用的培養(yǎng)物過(guò)夜培養(yǎng),用緩沖蛋白胨水做10倍倍比稀釋。將測(cè)試板分成4等份,并且每一部分標(biāo)記好所用培養(yǎng)物的稀釋倍數(shù)。
從高濃度開(kāi)始,將相應(yīng)稀釋倍數(shù)的培養(yǎng)物放在相應(yīng)的1/4圓內(nèi)。并對(duì)質(zhì)控板做同樣的操縱。將每滴培養(yǎng)物在相應(yīng)的1/4圓內(nèi)涂布,并在37°C培養(yǎng)18小時(shí)。計(jì)數(shù)測(cè)試和質(zhì)控板zui低稀釋倍數(shù)的克隆數(shù)。
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