大多數哺乳動物的細胞不管是在體內還是在體外均需要依附一定的底物生長,在體外培養(yǎng)細胞時,這些底物可以是其他細胞、膠原、玻璃或塑料等,這一過程,我們稱之為“貼壁”。在這個過程中,細胞首先會分泌一些細胞外基質,這些細胞外基質黏附在支持物的表面(如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿等),細胞則通過其表面表達的黏附因子與這些細胞外基質結合,從而實現貼壁,接著細胞將在這些支持物的表面慢慢伸展成其原來的形態(tài)。
但當細胞長滿底物時,我們就要想辦法讓細胞從培養(yǎng)底物上脫落下來。針對貼壁細胞,傳統(tǒng)的細胞消化方式有三種:物理機械法、離子螯合法、酶消化法。
細胞消化法 | 原理 | 缺點 |
物理機械法 | 直接用液體吹打或用刮刀,施予外力讓細胞與培養(yǎng)底物分離 | 無法量化控制外力,細胞分散效果差,可能會造成大量細胞破損 |
離子螯合法 (EDTA) | 不破壞細胞表面分子,僅與CAMs螯合,加速細胞與培養(yǎng)底物的脫落 | 顯著影響PH值,且不會被中和,必須用緩沖鹽溶液清洗離心 |
酶消化法 | 用蛋白水解酶消化連接細胞及培養(yǎng)底物的蛋白質,如、膠原酶等 | 破壞細胞表面蛋白,易導致細胞膜受損 |
不管是用物理機械法、離子螯合法還是酶消化法,都會影響細胞表面蛋白的表達,損害細胞健康,降低細胞活力。
表面蛋白表達受影響?
細胞健康被損害?
細胞活力降低?
難題多多,我們該怎么解決?
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專為細胞傳代、細胞移植、細胞外基質研究等而設計。表面為特殊的、均一的溫度敏感性的納米聚合物涂層,當溫度從37°C下降到4°C的過程中,溫敏表面逐步從輕度疏水性轉變?yōu)橛H水性,無需、無需刮刀,只需溫度誘導即可輕松實現貼壁細胞的無損傷收獲。
地保持了細胞表面受體和抗原的完整性及細胞的高活性,同時簡化了細胞培養(yǎng)和組織工程技術,最小化實驗操作時間。
*當溫度從37°C下降到4°C的過程中,溫敏表面逐步從輕度疏水性轉變?yōu)橛H水性,輕松實現貼壁細胞的無損傷收獲。
產品優(yōu)勢
▲ 國家發(fā)明技術(號:ZL.3)
▲ 只需通過降低溫度即可誘導細胞脫落,簡單、快速、易操作
▲ 無需消化:更好的保持細胞表面蛋白和標記物的完整性
▲ 無需細胞刮刀:避免細胞機械損傷,保證細胞高活性
▲ 優(yōu)化細胞培養(yǎng)流程和組織工程技術
使用L929細胞在37℃、5%CO2培養(yǎng)48小時,細胞匯合率>80%時收獲
在4℃環(huán)境保持15-20min后吹打的圖片,細胞脫落率>80%-90%
技術應用
CellDETACH TM溫敏培養(yǎng)表面,已經過嚴格的第三方質量和性能檢測,包括:理化檢測、生物學兼容性測試、溶血測試、細胞毒性測試、內毒素測試、無DNA酶/RNA酶測試及溫敏脫落率測試,其具有良好的溫度誘導收獲能力和良好的生物相容性,可廣泛應用于細胞擴增培養(yǎng)、細胞治療、3D組織建模、細胞外基質研究等。
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