堿蓬又稱為翅堿蓬,俗稱“鹽蒿",堿蓬幼苗俗稱龍須菜,為藜科堿蓬,屬一年生草本植物[1-3]。堿蓬綠色天然,幼嫩的堿蓬味道鮮美,富含脂肪、蛋白質(zhì)、維生素、氨基酸和微量元素[1,4]。堿蓬還可入藥,中醫(yī)認(rèn)為堿蓬具有清熱、消食之功效,常入藥治療發(fā)熱、積食。堿蓬提取物具有抗癌、抗衰老、抗炎、降血糖、降血壓、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等多種功能[3,4]。
目前,從安全性、藥理性等方面考慮,天然色素越來(lái)越受到人們的青睞,但天然色素越來(lái)越受到人們的青睞,但天然色素容易受外界條件的影響而穩(wěn)定性較差。該研究探討了經(jīng)過(guò)AB-8打孔吸附樹(shù)脂純化的堿蓬紅色素的吸收光譜、理化性質(zhì),為堿蓬的開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。
一、材料與分析儀器
1、實(shí)驗(yàn)材料
堿蓬:將采來(lái)的堿蓬快速用自來(lái)水沖洗干凈,然后用蒸餾水快速?zèng)_洗2遍,用干凈的干紗布吸干表面的水珠,放入30-50℃干燥箱中烘干,過(guò)篩備用。
2、分析儀器
UV-5500紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海元析儀器有限公司)
3、試劑
無(wú)水乙醇、95%乙醇、甲醇、鹽酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂、氯化鋅、氯化銅、氯化亞鐵、三氯化鐵、維生素C、亞硫酸鈉,均為分析純。
二、實(shí)驗(yàn)方法
1、堿蓬紅色素的制備
(1)堿蓬紅色素的提?。悍Q取80目堿蓬粉末30g按固液比1:20加入去離子水,在25 ℃下超聲提取10min,取出,抽濾,將濾液置于干燥潔凈的棕色瓶中,濾渣按固液比1:10反復(fù)提取3~4次,直到濾液無(wú)色,合并濾液。
(2)堿蓬紅色素提取液的濃縮:將濾液于40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至濾液略粘稠。
(3)堿蓬紅色素的分離純化:首先將AB-8大孔樹(shù)脂用95%乙醇浸泡24h后,用蒸餾水沖洗2遍,進(jìn)行濕法裝柱,裝柱時(shí)注意避免柱中氣泡的產(chǎn)生,而后繼續(xù)用蒸餾水沖洗至中性,即可使用。將濃縮后的濾液緩慢倒入大孔樹(shù)脂柱上,待*被吸附后,以2倍樹(shù)脂體積的蒸餾水洗脫雜質(zhì),當(dāng)水的顏色變?yōu)闇\紅色時(shí),以30%乙醇作為洗脫液洗脫色素,控制流速為2L/min,收集洗脫液,直到大孔樹(shù)脂中無(wú)紅色素。
(4)洗脫液的濃縮、干燥:洗脫液于40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至濃稠。而后在冷凍干燥儀的多歧管進(jìn)行干燥,提前打開(kāi)冷凍干燥儀,當(dāng)溫度降低到-40℃時(shí),將色素溶液放入瓶中,進(jìn)行預(yù)凍,然后在-60℃溫度下進(jìn)行冷凍干燥,最終得到暗紅色粉末。于4℃冰箱中避光保存。
2、堿蓬紅色素的光譜特性
稱取0.0100g堿蓬紅色素粉末,溶于10ml去離子水中,用去離子水定容至100ml,配制成0.1mg/ml的堿蓬紅色素溶液。在350~600nm波長(zhǎng)下,每隔2nm掃描其吸收光譜,確定最大吸收波長(zhǎng)。
3、堿蓬紅色素的理化性質(zhì)分析
稱取0.2000g堿蓬紅色素粉末,溶于100ml去離子水中,并定容至1000ml,配制成0.2mg/ml堿蓬紅色素溶液,于暗處避光保存,以備下列實(shí)驗(yàn)所用。
(1)溫度對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
取上述色素溶液7份各10ml于7支試管中,分別置于40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃下保溫1h,取出,觀察記錄顏色變化。冷卻至室溫后,在最大波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光值。
(2)酸堿性對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
取上述色素溶液8份各5ml于8支試管中,分別加入5ml,pH值為5.7、6.0、6.3、6.8、7.0、7.3、7.7、8.0的磷酸鹽緩沖溶液,充分混合均勻,室溫避光放置1h,觀察記錄顏色變化。在最大波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光值。
(3)金屬離子對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
配制濃度為0.02%的氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂、氯化鋅、氯化銅、氯化亞鐵、三氯化鐵溶液。取色素溶液8份各5ml于8支試管中,分別加入5ml上述不同金屬離子溶液,充分混合均勻,室溫避光放置1h,觀察記錄顏色變化。在最大波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光值。
(4)氧化劑對(duì)堿蓬紅色素的影響
將亞硫酸鈉配制成濃度為0%、0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%的溶液。取色素溶液6份各5ml于6支試管中,分別加入5ml上述不同濃度的亞硫酸鈉溶液,室溫避光放置1h,觀察記錄顏色變化。在最大波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。
(5)還原劑對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
將維生素C配制成濃度為0%、0.02%、0.04%、0.08%、0.16%、0.32%、0.64%的溶液。取色素溶液7份各5ml于7支試管中,分別加入5ml上述不同濃度的維生素C溶液,室溫避光放置1h,觀察記錄顏色變化。在最大波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光值。
三、結(jié)果與分析
1、堿蓬紅色素的光譜特性分析
圖1 堿蓬紅色素的吸收光譜
由圖1可以看出,堿蓬紅色素在波長(zhǎng)540nm處具有最高吸收峰。因此,確定堿蓬紅色素的最大吸收波長(zhǎng)為540nm[5]。
2、堿蓬紅色素的理化性質(zhì)
(1)溫度對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
圖2 溫度對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
(2)光照對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
圖3 光照對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
(3)pH對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
圖4 pH對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
(4)金屬離子對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
圖5 金屬離子對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
(5)氧化劑對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
圖6 氧化劑對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
(6)還原劑對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
圖7 還原劑對(duì)堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
四、結(jié)論
(1)堿蓬紅色素在波長(zhǎng)540nm處有最大吸收峰,通過(guò)紅外光譜分析確定堿蓬紅色素為酚類化合物。堿蓬紅色素易溶于水,為水溶性色素。
(2)高溫能破壞堿蓬紅色素的穩(wěn)定性,氧化劑、還原劑對(duì)堿蓬紅色素的穩(wěn)定性有一定影響,但在一定濃度范圍內(nèi),濃度大小對(duì)其影響不明顯。金屬離子Na+ 、K+ 、Ca2+ 、Mg2+ 對(duì)堿蓬紅色素的影響較小,而Zn2+、Cu2+、Fe2+、Fe3+ 對(duì)堿蓬紅色素的影響較大。
參考文獻(xiàn):
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[4] 付建鑫,張桂香,張炳文,等.堿蓬的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及開(kāi)發(fā)利用[J].中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng),2019,25(4):53-69.
[5] 石紅旗,郝林華,趙貝貝. 鹽生植物翅堿蓬花青素類物質(zhì)研究[J]. 中國(guó)海洋藥物, 2005,24(6):32-36.
本文章內(nèi)容來(lái)源于:常麗新,賈長(zhǎng)虹,馮月.堿蓬紅色素的理化性質(zhì)及抗氧化作用研究[J].華北理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2021,43,3:143-152.
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