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技術(shù)文章

飼料中免疫球蛋白IgG的測(cè)定液相色譜法

點(diǎn)擊次數(shù):582 發(fā)布時(shí)間:2014-12-1

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用液相色譜儀測(cè)定飼料中免疫球蛋白IgG含量的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料、濃縮飼料、含IgG的飼料原料(包括血漿等)中免疫球蛋白IgG的測(cè)定。zui低檢出限為5μg(取樣1g,zui低檢出濃度為5mg/kg)。

原理:飼料中免疫球蛋白IgG的測(cè)定液相色譜法是根據(jù)親和色譜的原理,在磷酸鹽緩沖鹽條件下免疫球蛋白IgG與配基相連,在PH2.5的鹽酸*條件下洗脫免疫球蛋白IgG。
試劑:
磷酸二氫鉀 ,*, IgG標(biāo)準(zhǔn)液,流動(dòng)相A(PH6.5,0.05mol/l磷酸鹽緩沖液),流動(dòng)相B(PH2.5,0.05mol/l*鹽酸緩沖液),
儀器:
液相色譜儀(具紫外檢測(cè)器和梯度洗脫裝置). 色譜工作站, 進(jìn)樣閥,實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備,PH計(jì) ,勻漿機(jī) ,超純水裝置。
色譜條件:
色譜柱:Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1ml
波長(zhǎng):280nm
進(jìn)樣量:20ul
流動(dòng)相:流動(dòng)相A=PH6.5 0.05mol/l磷酸鹽緩沖液 流動(dòng)相B=PH2.5 0.05mol/min*鹽緩沖液
        時(shí)間          流速ml/min   流動(dòng)相A%     流動(dòng)相B%
        0-4.5           0.5              100          0
        4.5-15.0      0.5              0            100
        15.0-26.0    0.5             100          0

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