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豬低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）ELISA試劑盒測(cè)定步驟

時(shí)間：2020/9/10閱讀：597
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　　豬低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）ELISA試劑盒測(cè)定步驟：
 
　　1.加樣
 
　　1. 除包被外都需45度加樣
 
　　2.加樣體積要準(zhǔn)確
 
　　3.管底加樣，不能加在管壁上
 
　　4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
 
　　2.溫浴
 
　　1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
 
　　2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
 
　　3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
 
　　4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
 
　　3.洗滌
 
　　1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
 
　　2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
 
　　4.讀板
 
　　1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
 
　　2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

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