在進(jìn)入正題之前，杰懋小編有話說：
自2019年12月以來，新型冠性病毒已經(jīng)*施虐了我們2個(gè)月的時(shí)間，這場無聲的硝煙比我們想象中的要來得激烈，這場戰(zhàn)爭比我們想象中要更持久，經(jīng)過千千萬萬位白衣天使的努力和付出，經(jīng)過廣大民眾以及社工人員的堅(jiān)持和努力，疫情總算在一點(diǎn)一點(diǎn)得到控制。
然而，在近兩天，網(wǎng)上突然鋪天蓋地般地出現(xiàn)了人群開始松懈、摘掉口罩聚集的消息，這是一件多么可怕的事情！截止2020年2月23號(hào)，鐘南山戰(zhàn)士稱當(dāng)前疫情仍然嚴(yán)峻，目前已達(dá)到吃勁的時(shí)候，所以，希望廣大民眾在安全響應(yīng)解除之前都別掉以輕心，否則白衣天使的夜以繼日的拼命就白費(fèi)了，之前足不出戶的堅(jiān)持都白費(fèi)了！
國家衛(wèi)健委批準(zhǔn)，1月25日發(fā)布的《北京協(xié)和醫(yī)院關(guān)于“新型冠狀病毒感染的肺炎”診療建議方案(V2.0)》第二條“2019-nCoV病人的診療-診斷標(biāo)準(zhǔn)中提到：對于急性發(fā)熱對于急性發(fā)熱(72h內(nèi)，體溫大于37.5度)且肺部影像學(xué)正常者，若外周血淋巴細(xì)胞覺對值小于0.8×109/L，或出現(xiàn)CD4及CD8 T細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯下降者，即使核酸檢測未呈現(xiàn)陽性，均應(yīng)居家隔離密切觀察。病人常規(guī)檢查中提到：1、篩查病例，就診當(dāng)日可酌情查炎癥因子(IL-6,IL-10,TNF-α)、TB亞群11項(xiàng).2、確診病人序貫檢查，第5-7天若有條件可復(fù)查TB淋巴細(xì)胞亞群11項(xiàng)。
因?yàn)槊庖呤艿脚R床的重視，許多*病人的定點(diǎn)醫(yī)院都開展了流式的檢測。對于流式工作的老師，除了結(jié)果的準(zhǔn)確及解讀以外，也需要關(guān)注生物安全的防護(hù)。
下面就整理的流式樣本處理過程中一些注意事項(xiàng)，獻(xiàn)給我們的流式工作者們。
01樣本加樣：
建議在生物安全柜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，如有液體濺出，用浸濕75%酒精的紗布覆蓋后擦拭。個(gè)人按照3級(jí)生物安全進(jìn)行防護(hù)。
2019-nCov 生物安全防護(hù)措施：
? 一級(jí)生物安全防護(hù)：醫(yī)用外科口罩、乳膠手套、工作服、醫(yī)用防護(hù)帽，加手衛(wèi)生
? 二級(jí)生物安全防護(hù)：醫(yī)用防護(hù)口罩或N95口罩、乳膠手套、工作服、外隔離衣、醫(yī)用防護(hù)帽，加手衛(wèi)生，酌情可加護(hù)目鏡。
? 三級(jí)生物安全防護(hù)：醫(yī)用防護(hù)口罩或N95、雙層乳膠手套、面屏、護(hù)目鏡、工作服外防護(hù)服、雙層醫(yī)用防護(hù)帽，加手衛(wèi)生、必要時(shí)雙層口罩(外醫(yī)用防護(hù)口罩，內(nèi)N95)。
02溶血及固定：
根據(jù)衛(wèi)生部2011年發(fā)布的《流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群指南》，盡量使用含固定劑的溶血素可以達(dá)到滅活病毒的作用。
如使用其他不帶固定劑成分的溶血素如氯化銨，也可以配制0.1%-2.0%的多聚甲醛或甲醛，或者稀釋好的細(xì)胞保存液在溶血時(shí)一起加入，并且放置30min，可以達(dá)到滅活病毒的作用。
03混勻、離心等步驟防護(hù)：
滅活前的樣品處理步驟，須嚴(yán)格按照三級(jí)防護(hù)，謹(jǐn)防氣溶膠污染，例如：
? 使用帶生物安全密封蓋或密封杯的離心機(jī)進(jìn)行離心(如德國NACHT納赫特高速冷凍離心機(jī)NACHTC-30R配套的透明密封杯系列)，樣品管/流式管優(yōu)選帶密封蓋離心，不使用自動(dòng)脫帽離心功能；
? 即使室溫離心，也選用密封更良好的制冷型離心機(jī)(如德國NACHT納赫特NACHTC-30R)，并置于負(fù)壓抽風(fēng)區(qū)域；
? 離心后靜置10-30分鐘再開蓋，仔細(xì)觀察樣品無泄漏后，再把透明密封杯移至生物安全柜再開蓋取樣。
04儀器的清洗及維護(hù)：
如有樣本的灑溢，請用浸濕75%酒精的紗布覆蓋30min后擦拭，包括樣本進(jìn)樣針。
流式細(xì)胞儀的廢液桶中需要裝有占其體積 1/10的0.71mol/L次氯酸鈉 (未稀 釋的家用漂白劑)。 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備應(yīng)該用具有滅活傳染源作用的溶液或新配制的 10%家用漂白劑消毒 ,尤其在設(shè)備維修和保養(yǎng)前給予嚴(yán)格消毒。
在這緊要的關(guān)頭，奮戰(zhàn)在一線的戰(zhàn)士希望你們平安健康，還未可出門的朋友希望你們繼續(xù)堅(jiān)持一下，已經(jīng)復(fù)工的小伙伴們希望你們千萬注意防護(hù)和安全，待到疫情結(jié)束，我們再去武漢看櫻花，再看祖國這大好山河的春意盎然。
參考資料：
1. 《北京協(xié)和醫(yī)院關(guān)于“新型冠狀病毒感染的肺炎”診療建議方案(V2.0)》
2. 2019新型冠狀病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢測的生物安全指南(試行diyi版)--中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)
3. 流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群指南--2011版衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
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