液相色譜對(duì)于實(shí)驗(yàn)室分析員來(lái)說(shuō)是容易上手的儀器了，但就算是經(jīng)驗(yàn)豐富的分析員都會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)錯(cuò)誤的操作導(dǎo)致液相色譜儀器發(fā)生故障。而這個(gè)時(shí)候分析員一般就會(huì)選擇把色譜柱進(jìn)行反沖這個(gè)方法，但恒譜生在這里建議分析員在一般情況下還是不要反沖色譜柱，除非色譜柱有特別說(shuō)明是可以反沖的。
那么，哪些柱子不能反向沖洗呢？其實(shí)有兩種，一種是兩端柱篩板不一樣是不適合的，因?yàn)槿肟诘哪且欢酥Y板的孔徑比較大會(huì)導(dǎo)致固體顆粒物質(zhì)的堵塞，所以一旦進(jìn)行反沖就有可能出現(xiàn)造成填料的流失從而導(dǎo)致分析柱的柱效下降的情況；另一種就是色譜分析柱柱頭塌陷或變型是不宜反沖的，因?yàn)橹^塌陷或變型了會(huì)在柱頭上留下縫隙，從而在反沖的時(shí)候會(huì)導(dǎo)致柱床移動(dòng)和填料松動(dòng)。
雖然液相色譜柱不應(yīng)該隨便進(jìn)行反沖，但如果明確知道來(lái)自顆粒物堵塞篩板或柱頭污染時(shí)，反沖色譜柱是一種補(bǔ)救措施。但反沖前確認(rèn)柱子是否能夠進(jìn)行反沖，反沖的時(shí)候要注意以下幾點(diǎn)：
1、在把堵塞在入口那一段端的篩板上的污染物沖出來(lái)的同時(shí)，柱頭的填料可能也會(huì)被沖出來(lái)造成柱效的降低，甚至色譜柱的報(bào)廢。
2、如果色譜柱出入口篩板孔徑不一致的話，反沖色譜柱就有可能造成填料漏出，柱效降低等
3、根據(jù)自己用的柱子情況分析到底是什么原因堵塞，可以用易溶于污染物的溶劑來(lái)清洗。目前較多的是緩沖鹽鹽析造成，可以用大量的水來(lái)沖洗。
4、反沖后要把柱子正過(guò)來(lái)使用，盡量避免長(zhǎng)期反復(fù)正反使用。
除了反沖，想要延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，可以在分析柱前連接液相保護(hù)柱。保護(hù)柱安裝在HPLC系統(tǒng)的進(jìn)樣閥和色譜柱之間，目的用于保護(hù)色譜柱和延長(zhǎng)色譜柱使用壽命。恒譜生液相制備保護(hù)柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟(jì)和有效的保護(hù)，延長(zhǎng)了液相色譜柱的壽命，保證分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時(shí)間的增加，高效液相色譜柱分離效能下降，柱壓增高，其原因主要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量填料被污染引起的，而色譜柱整個(gè)柱床并未被破壞，使用色譜柱保護(hù)柱，相當(dāng)于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護(hù)整個(gè)UPLC色譜柱的作用。
今天恒譜生分享的知識(shí)先到這啦，希望對(duì)您的工作有所幫助！
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