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1、安放：生物安全柜應放在遠離人員的活動、物品流動、門以及窗等可能會擾亂氣流的地方。在生物安全柜后面、左右各留 30 c m空間，上端留 30~ 50 c m 空間，以便于維修和更換濾膜。
2、操作：使用生物安全柜操作時，檢驗人員手和背的伸入或取出時應緩慢以保證氣流的完整性，并垂直于前端開口處。手或胳膊伸入柜中 1 m i n后開始操作以便于清潔皮膚表面。實驗所需器材應一次性放入生物安全柜。盡量減少或限制操作人員手在安全柜中的進出次數。
3、實驗材料的放置： A2生物安全柜前端開口處嚴禁被紙張、設備或其他物品覆蓋。物品放入安全柜時，表面要用70% 乙醇檫拭。柜內應該備有一塊浸過消毒液的毛巾，以便蘸取濺在柜的表面的傳染性液滴。實驗器材應按順序從清潔的排放到污染的。污染的實驗材料不應隨意拿出柜外，操作者的手也不應頻繁地進出安全柜。
4、操作和維護：大多數的 A2型生物安全柜設計成一天 24 h開機，調查發(fā)現(xiàn)連續(xù)開機有利于控制實驗室灰塵和粒子。 A2型生物安全柜不用時可以關閉，但A2型生物安全柜在使用時要保持實驗室空氣平衡，因此一天中若有數個操作過程，其間不應中斷運行。實驗開始前 5 m i n就應啟動安全柜，凈化局部空氣。使用中若出現(xiàn)任何故障均應及時向上級人員報告并請專職技術人員維修。
5、紫外線： A2型生物安全柜中不需要紫外線燈假如要用，每周要對燈管作清潔，除去塵埃，保證殺菌效果定期監(jiān)測紫外線燈的輻射強度。要防止紫外線對眼睛和皮膚的灼傷。