茂默科學(xué)以客戶為本、合作共贏的理念，致力于幫忙客戶提供整體實(shí)驗(yàn)方案。力求解決行業(yè)內(nèi)客戶對科學(xué)儀器選型難、維護(hù)難的處境。通過不斷優(yōu)化公司運(yùn)作和提升服務(wù)質(zhì)量，目前已贏得業(yè)內(nèi)人士和廣大客戶廣泛認(rèn)可，擁有廣泛而穩(wěn)固的合作伙伴和客戶群體?，F(xiàn)介紹標(biāo)準(zhǔn)化生物實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)規(guī)范準(zhǔn)則之實(shí)驗(yàn)室儀器與器具操作。
生物實(shí)驗(yàn)室傷害以及與工作有關(guān)的感染主要是由于人為失誤、不規(guī)范的實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作以及儀器使用不當(dāng)造成的。以下簡要介紹生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范操作技術(shù)和方法。
1、移液管和移液器
使用移液管和移液器時(shí)應(yīng)注意:①使用移液管時(shí)應(yīng)使用吸球或定量移液器；②移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染；③為減少氣溶膠的產(chǎn)生，應(yīng)避免向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體，避免將移液管中的液體用力吹出，刻度移液管不需要排出后一滴液體；④污染的移液管需*浸入盛有消毒液的防碎容器中消毒至規(guī)定時(shí)間。盛放廢棄移液管的容器應(yīng)放在生物安全柜內(nèi)；⑤打開封口瓶子時(shí)應(yīng)使用移液管的工具，避免使用皮下注射針頭和注射器；⑥為避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴(kuò)散，在工作臺面應(yīng)放置浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙，使用后按感染性廢棄物處理；⑦在每階段工作結(jié)束后，必須采用適當(dāng)?shù)南緞┣宄ぷ鲄^(qū)的污染。
2、微生物接種環(huán)
要求直徑2～3mm并*封閉，柄的長度小于6cm以減小抖動。使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán)，或使用一次性接種環(huán)。
3、生物安全柜
使用生物柜應(yīng)注意:①須具有生物安全柜書面規(guī)章、使用操作說明或安全手冊；②生物安全柜應(yīng)在運(yùn)行正常時(shí)使用，所有工作必須在工作臺面的中后部進(jìn)行；③安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或標(biāo)本，避免任何物品阻擋安全柜內(nèi)前后的空氣格柵，避免影響安全柜后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)；④盡量減少操作者身后的人員活動，避免操作者手臂在安全柜里反復(fù)移出和伸進(jìn)，以防干擾安全柜氣流；⑤在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行5分鐘；⑥實(shí)驗(yàn)完成后以及每天工作結(jié)束時(shí)，應(yīng)使用適當(dāng)?shù)南緞ι锇踩竦谋砻孢M(jìn)行擦拭；⑦在生物安全柜內(nèi)操作時(shí)，不得進(jìn)行文字工作。
4、離心機(jī)、勻漿器、組織研磨器、搖床、攪拌器和超聲處理器
避免氣溶膠及標(biāo)本的溢出，保證儀器正常運(yùn)行是使用這些儀器的基本原則。
(1)離心機(jī):離心機(jī)運(yùn)行操作、離心管標(biāo)本裝量與配平、離心機(jī)維護(hù)等內(nèi)容見第二章常用儀器設(shè)備安全使用。操作具有生物危害的樣本時(shí)，需要特別注意:①離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。操作危險(xiǎn)度Ⅲ級和Ⅳ級的微生物，必須使用可封口的離心桶(安全杯)。②應(yīng)每天檢查離心機(jī)內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染，以評估離心操作規(guī)范。每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機(jī)腔的污染。
(2)勻漿器、組織研磨器、搖床、攪拌器和超聲處理器:使用以上儀器時(shí)應(yīng)注意:①使用專門提供實(shí)驗(yàn)室用的以上儀器。確認(rèn)儀器運(yùn)轉(zhuǎn)正常。②由于玻璃可能破碎而釋放感染性物質(zhì)并傷害操作者，建議使用塑料容器，如聚四氟乙烯(PTFE)容器。③用勻漿器、搖床和超聲處理器時(shí)，應(yīng)該用結(jié)實(shí)透明的塑料箱覆蓋設(shè)備，并在用完后消毒。可能的話，這些儀器可在生物安全柜內(nèi)覆蓋塑料罩進(jìn)行操作。④使用玻璃研磨器時(shí)要求戴手套并用吸收性材料包住。建議使用塑料研磨器。⑤操作結(jié)束后，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)打開容器。⑥超聲處理器操作人員應(yīng)采取聽力保護(hù)措施。
5、冰箱
實(shí)驗(yàn)室冰箱應(yīng)明確其規(guī)定用途。使用中應(yīng)注意:①冰箱、低溫冰箱和干冰柜應(yīng)當(dāng)定期除霜和清潔，應(yīng)清理出所有在儲存過程中破碎的安瓿和試管等物品。清理時(shí)應(yīng)戴厚橡膠手套并進(jìn)行面部防護(hù)，清理后要對內(nèi)表面進(jìn)行消毒。②儲存在冰箱內(nèi)的所有容器應(yīng)當(dāng)清楚地標(biāo)明內(nèi)裝物品的科學(xué)名稱、儲存日期和儲存者的姓名。未標(biāo)明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高壓滅菌并丟棄。③應(yīng)當(dāng)建立凍存物品清單④除非有防爆措施，否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。冰箱門上應(yīng)明確標(biāo)示。
6、玻璃器皿和銳器
實(shí)驗(yàn)室中盡可能用塑料制品代替玻璃制品。必須使用玻璃器皿時(shí)只能用實(shí)驗(yàn)室級別的玻璃，任何破碎或有裂痕的玻璃制品均應(yīng)丟棄。實(shí)驗(yàn)過程中不得將注射針作為移液管使用，減少使用注射器和針頭。如必須使用注射器和針頭時(shí)，采用銳器安全裝置。嚴(yán)禁重新給用過的注射器針頭戴護(hù)套。實(shí)驗(yàn)中盡量用巴斯德塑料吸管代替玻璃吸管。
7、裝有凍干感染性物質(zhì)安瓿開啟與儲存
(1)安瓿開啟:安瓿開啟應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，開啟前消毒安瓿外表面。用砂輪在安瓿凍干物遠(yuǎn)端中部銼一痕跡，取酒精浸泡的棉花將安瓿包起來以保護(hù)雙手，然后手持安瓿從標(biāo)記的銼痕處打開。小心移去安瓿頂部，如果安瓿內(nèi)裝有棉花，用消毒鑷子除去。棄去物均按污染材料處理。緩慢向安瓿中加入液體來重懸凍干物，避免出現(xiàn)泡沫。
(2)安瓿儲存:裝有感染性物品的安瓿不得浸入液氮中，以避免有裂痕或密封不嚴(yán)的安瓿在取出時(shí)破碎或爆炸。建議將感染性物品真空冷凍干燥，儲存于-80℃冰箱或干冰中。從冷藏處取出安瓿時(shí)，實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)當(dāng)進(jìn)行眼睛和手的防護(hù)。
8、感染性物品的操作
(1)血樣采集:由受過培訓(xùn)的人員采集病人或動物血樣。采集靜脈血時(shí)，使用一次性安全真空采血管取代傳統(tǒng)的針頭和注射器。所有操作均必須戴手套。裝有標(biāo)本的試管應(yīng)置于二級容器中運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室，并在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)。檢驗(yàn)申請單應(yīng)當(dāng)分開放置在防水袋或信封內(nèi)，接收人員不應(yīng)打開這些袋子。
(2)血清分離:操作人員需經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)。操作時(shí)應(yīng)戴手套以及眼睛和黏膜的保護(hù)裝置。實(shí)驗(yàn)操作中避免或盡量減少氣溶膠的產(chǎn)生。血液和血清應(yīng)小心吸取，不得傾倒。嚴(yán)禁用口吸液。帶有血凝塊等廢棄標(biāo)本管，加蓋后放于防漏容器內(nèi)高壓滅菌。操作前應(yīng)準(zhǔn)備相應(yīng)種類的消毒劑，用于及時(shí)處理可能噴濺和溢出的標(biāo)本。
(3)涂片、蓋玻片、組織及組織切片:用于顯微鏡觀察的血液、唾液、尿液、糞便、分泌物和骨髓標(biāo)本在固定和染色時(shí)，不必殺死涂片上的所有微生物和病毒。所使用的載玻片、蓋玻片、染色及洗液等廢棄物均應(yīng)按污染物進(jìn)行處理，并經(jīng)相應(yīng)消毒液浸泡或高壓滅菌后再丟棄。組織標(biāo)本應(yīng)用甲醛或多聚甲醛固定。應(yīng)當(dāng)避免冷凍切片。如果必須進(jìn)行冷凍切片，應(yīng)當(dāng)使用安全罩，操作者要戴安全防護(hù)面罩。清除污染時(shí)，儀器溫度要求升至20℃。
(4)朊蛋白(prion)相關(guān)組織:操作過程必須在生物安全柜中進(jìn)行，在生物安全柜的工作臺面使用一次性防護(hù)罩。實(shí)驗(yàn)人員必須穿戴一次性隔離衣和圍裙和手套，病理學(xué)家應(yīng)戴特制的具有鋼絲網(wǎng)的兩層橡膠手套。盡可能地使用一次性塑料器具，使用儀器設(shè)備，不與其他實(shí)驗(yàn)室共用儀器。
含有朊蛋白的組織標(biāo)本暴露于96%甲酸1小時(shí)可以基本失活。實(shí)驗(yàn)廢棄物，包括一次性手套、隔離衣和圍裙，均應(yīng)當(dāng)采用多孔負(fù)荷蒸汽滅菌器在134～137℃高壓滅菌18分鐘一個(gè)循環(huán)，或高壓滅菌3分鐘六個(gè)循環(huán)，然后再焚燒。
朊蛋白的感染性廢液應(yīng)當(dāng)用終濃度含20g/L有效氯的次氯酸鈉處理1小時(shí)。污染的生物安全柜和其他表面可以采用含20g/L有效氯的次氯酸鈉處理1小時(shí)來清除污染。不能高壓滅菌的用具可以反復(fù)用含20g/L有效氯的次氯酸鈉潤濕超過1小時(shí)來進(jìn)行清潔，并要求用水沖洗以清除殘留的次氯酸鈉。
操作朊蛋白相關(guān)組織還應(yīng)注意:①鋼絲網(wǎng)手套由于不是一次性用品，必須進(jìn)行污染物的清除。②朊蛋白對紫外線照射也具有抵抗力。雖然甲醛不能有效降低標(biāo)本中朊蛋白感染性，但安全柜仍必須用標(biāo)準(zhǔn)方法來清除污染(如甲醛蒸氣)，以滅活可能存在的其他微生物因子。③HEPA過濾器摘除后需要在至少1000℃的溫度下焚燒。
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