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SRM 1649b 城市塵埃中PAHs對(duì)皮膚細(xì)胞的影響

閱讀:783      發(fā)布時(shí)間:2022-5-27
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CCK8 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)檢測(cè) SRM1649b 對(duì)皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞及皮膚成纖維細(xì)胞增殖的影響

      已有研究表明 PAHs 可以破壞皮膚角質(zhì)層及緊密連接,皮膚屏障受損是皮膚敏感 患者的發(fā)病的主要病因,然而 PAHs 是否作用于皮膚細(xì)胞的衰老和老化至今仍不清 楚。為此,下面采用了一種成分為 SRM1649b 的 PAHs 標(biāo)準(zhǔn)品來刺激皮膚角質(zhì)細(xì)胞和皮膚成纖維細(xì)胞,首先觀察在 SRM1649b 刺激下,這些皮膚細(xì)胞是否出現(xiàn)老化現(xiàn)象。 通過不同濃度,以及不同處理時(shí)間的 SRM1649b 刺激,HaCaT 及 NHDF 細(xì)胞均出現(xiàn) 增殖能力減弱的現(xiàn)象,并且與刺激濃度與時(shí)間呈現(xiàn)明顯的負(fù)相關(guān)(p<0.05)。而增殖 能力減弱正是細(xì)胞出現(xiàn)衰老的首要表型之一。這部分研究結(jié)果提示 SRM 1649b 城市塵埃 潛在調(diào)控皮膚細(xì)胞衰老。

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SRM1649b 對(duì)皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞及皮膚成纖維細(xì)胞周期的影響  

      通過 CCK8 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),SRM1649b 處理時(shí),HaCaT 及 NHDF 細(xì)胞均出現(xiàn)增 殖能力減弱的衰老表型。為進(jìn)一步證實(shí)這個(gè)現(xiàn)象,在接下來檢測(cè)在不同濃度的 SRM1649b 刺激下,HaCaT 及 NHDF 細(xì)胞的細(xì)胞周期是否出現(xiàn)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 HaCaT 在 SRM1649b 刺激時(shí),隨著刺激濃度的加大,細(xì)胞周期明顯阻滯在 G1/S 期。 同樣為了進(jìn)一步證實(shí)細(xì)胞被阻滯在 G1/S 期,我們檢測(cè)了 G1 期向 S 期轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵調(diào) 控分子,Cyclin A 以及 Skp2 的表達(dá)量。結(jié)果一致顯示,隨著刺激濃度的加大,這兩 個(gè)分子的表達(dá)受到了極大的抑制。而用 SRM1649b 刺激 NHDF 細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)細(xì)胞周 期不同程度的被阻滯在 G1/S 期,提示 SRM1649b 多個(gè)作用途徑的導(dǎo)致皮膚細(xì)胞阻滯。 這些結(jié)果進(jìn)一步提示 SRM 1649b 城市塵埃刺激下,皮膚細(xì)胞通過細(xì)胞周期的阻滯來導(dǎo)致增殖 減弱。


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SRM1649b 對(duì)皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞及皮膚成纖維細(xì)胞凋亡的影響

       除了 SRM 1649b 城市塵埃PAHs 能導(dǎo)致細(xì)胞增殖能力減弱,細(xì)胞周期阻滯以外。最重 要的一個(gè)方面是,它能破壞被處理的細(xì)胞 DNA 損傷修復(fù)系統(tǒng),使細(xì)胞積累大量的 DNA 損傷,從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡,或者惡性突變。這也是皮膚細(xì)胞接受這些刺激時(shí)發(fā) 生病變的最主要因素。為此,在接下來利用凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)檢測(cè) SRM1649b 刺激時(shí), 皮膚細(xì)胞的死亡是否增加?結(jié)果同樣顯示:隨著 SRM1649b 刺激濃度的增大,HaCaT NHDF 細(xì)胞均出現(xiàn)了大量的凋亡。


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總結(jié):SRM1649b 刺激時(shí),HaCaT 及 NHDF 細(xì)胞均體現(xiàn)出顯著的衰老表型,即 增殖能力減弱,細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡增加。以上三部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí) SRM 1649b 城市塵埃能顯著導(dǎo)致皮膚細(xì)胞衰老。


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