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方法精密度

將低、中、高三個濃度SRM 968f血清標(biāo)準(zhǔn)品溶液 加入 ４％ ＢＳＡ混合血清樣本經(jīng)本法處理后進行檢測， 每個濃度重復(fù)６次，連續(xù)檢測三天，計算日內(nèi)精密度 為 ０.９％ ～ ９.６％ ，日間精密度為 ３.０％ ～ ９.３％ （見表 ３）。 該方法同時測定６種脂溶性.維生素的日內(nèi)精密 度和日間精密度均在 １５％ 以內(nèi)，方法精密度滿足檢 測需求。

方法準(zhǔn)確度

將低、中、高濃度的SRM 968f血清標(biāo)準(zhǔn)品溶液加入混合血清樣本中按本法進行前處理后進行檢測，每 個濃度重復(fù)６次，計算加標(biāo)回收率，３個水平的加標(biāo) 回收率為８６.６％ ～ １０７.７％ ，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（ＲＳＤ）為１.４６％ ～ ９.３９％ （見表 ４）。 該方法加標(biāo)回收率均在８０％ ～ １２０％ 以內(nèi)，方法準(zhǔn)確度高滿足檢測需求。

方法驗證

采用建立的ＵＰＬＣ－ＭＳ ／ ＭＳ方法對 美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所（ＮＩＳＴ）制定的標(biāo)準(zhǔn)參照品SRM 968f血清 進行檢測，每個水平重復(fù) ２ 次取平均值，驗證方法準(zhǔn)確度。 結(jié)果表明，除２５－ＯＨ－ＶＤ２含量較 低未能檢出外，其它檢測結(jié)果與靶值偏差均在 ５％ 以內(nèi)，該方法檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠（表 ５）。

結(jié)論

研究建立了超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時 測定微量血清樣本中多種脂溶性.維生素的方法，并對 前處理過程中的蛋白沉淀試劑、萃取液用量，復(fù)溶液 等進行了優(yōu)化，以減少色譜圖中噪音干擾，改善色譜 峰形，提高檢測靈敏度。 并比較了不同色譜柱對多種 脂溶性.維生素尤其是不同類型維生素.Ｅ 的分離效果， 最終選擇 Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｆ５ 色譜柱，該色譜柱可 以實現(xiàn) β － 生育酚和 γ － 生育酚的有效分離。 本研究 中只需 ２０ μｌ 血清就能夠快速完成 ６ 種脂溶性.維生素 的測定。 該方法測定樣本需求量少、操作簡單、檢測 結(jié)果準(zhǔn)確快速可實現(xiàn)大量臨床樣本的同時檢測，尤其 對采血較為困難的嬰幼兒可以實現(xiàn)少量血液樣本檢 測多數(shù)項目的需求。

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