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CRM-GTX1&4-e 魚腥草毒素-1和-4的制備

用制備的標(biāo)度層析法從培養(yǎng)的亞歷山大藻中分離到Gonyau毒素-1和-4(GTX184)，經(jīng)LC-MS/MS[5，6](圖1和2)和1 HNMR確證其結(jié)構(gòu)和純度。用LC-高分辨質(zhì)譜(LC-HRMS)測定了GTX1和GTX4的[M+H]*離子，其測量精度m/z為412.0873(4=2 ppm)。用LC-ox-FLD[7](圖3)、毛細(xì)管電泳-紫外檢測(CE-JVD)[8]和化學(xué)發(fā)光氮檢測液相色譜(LC-CLND)[9]進(jìn)一步測定純度。

純化的GTX1&4在真空下干燥，溶于過濾、0.5mm HCl水溶液中，經(jīng)1 HNMR(QNMR)[10]定量，經(jīng)過濾(0.2 Pm)準(zhǔn)確稀釋，pH 3.5時脫氣0.5mm HCl，制得Crm-GTX184-e溶液，用氬填充琥珀玻璃安瓿，并立即火焰封閉，Eachampoule約含0.5 mL溶液。

分析方法與價值分配

CRM-GTX1&4-e(表1)的標(biāo)準(zhǔn)值基于NRC使用兩種分析方法得到的結(jié)果：用鄰苯二甲酸氫鉀(NIST SRM 84L)進(jìn)行校準(zhǔn)的qNMR和使用NRC CRM-GTX1&4-d進(jìn)行校準(zhǔn)的LC-MSIMS。

低水平的弓形蟲毒素-2和-3(GTX2&3)和去arbamoyigonyau毒素-1和-4(DcGTX184)-4(DcGTX184)由LC-MS使用NRC CRMS分配信息值(表2)。

同質(zhì)性

采用LC-MS/MS方法，從各充填系列中篩選出具有代表性的CRM-GTX184-e安瓿，觀察到GTX1和GTX4的響應(yīng)，無異質(zhì)性。

穩(wěn)定度

穩(wěn)定性研究表明，CRM-GTX1&4-e在+4~C溫度下，在密封安瓿中貯存的鹽酸中GTX1和GTX4具有良好的穩(wěn)定性。

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