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轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆ERM-BF436b是五種DAS-44406-6大豆粉末認(rèn)證參考物質(zhì)(CRMs)之一，含有不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的轉(zhuǎn)基因大豆。ERM-BF436b是由陶氏農(nóng)業(yè)科學(xué)公司(DAS，Oxon，UK)提供的轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆的全種子生產(chǎn)而成。

轉(zhuǎn)基因作物，是通過基因工程的方法在原有作物基 因組中添加其他生物的基因，敲除對(duì)作物生長(zhǎng)不利的基 因，從而培育出性狀更加優(yōu)良的作物。根據(jù)國(guó)際農(nóng)業(yè)生 物技術(shù)應(yīng)用服務(wù)組織報(bào)告，到2014年，全球轉(zhuǎn)基因作物 的種植面積為1.815億 hm2 。與1996年轉(zhuǎn)基因作物的種植 面積1 700萬(wàn) hm2 相比增幅約100 倍。2014年中國(guó)轉(zhuǎn)基因 作物種植面積達(dá)到390萬(wàn) hm2。

轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆ERM-BF436b是美國(guó)陶氏益農(nóng)公 司研發(fā)的能耐受草銨膦、草甘膦還有2,4-二氯苯氧乙酸 （2,4-滴）除草劑3 種成分的轉(zhuǎn)基因大豆品系。其中含 有的主要外來基因?yàn)閬碓从谑乘岽鳡柛Ｌ鼐腶ad-12基 因、來源于玉米的2mepsps基因和來源于綠色產(chǎn)色鏈霉菌 的pat基因。

轉(zhuǎn)基因DAS-44406-6大豆在QX 100微滴式dPCR系統(tǒng)的反應(yīng)條件較為寬松， dPCR與實(shí)時(shí)熒光定量PCR使用的引物和探針相同，也可 以獲得準(zhǔn)確結(jié)果。建立的轉(zhuǎn)基因大豆DAS-44406-6實(shí)時(shí) 熒光定量PCR特異性品系檢測(cè)方法檢測(cè)低限在模板DNA 濃度為100 ng/反應(yīng)時(shí)，為0.01%的轉(zhuǎn)基因大豆含量，約 為16.6 個(gè)拷貝的DAS-44406-6基因組DNA。轉(zhuǎn)基因DAS- 44406-6大豆品系dPCR相對(duì)靈敏度檢測(cè)方法在總DNA模 板濃度為50 ng/反應(yīng)時(shí)，能準(zhǔn)確定量到轉(zhuǎn)基因大豆含量為 1%，模板DNA濃度為0.5 ng/反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因樣品[25-28]。當(dāng) 轉(zhuǎn)基因大豆含量為0.1%時(shí)，能檢測(cè)出轉(zhuǎn)基因樣品，已超 過準(zhǔn)確定量范圍。絕對(duì)靈敏度檢測(cè)方法能準(zhǔn)確定量到模 板DNA質(zhì)量濃度為0.01 ng/μL的轉(zhuǎn)基因樣品，為16.6 個(gè) 拷貝。但是由于我國(guó)轉(zhuǎn)基因品系檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)為定性篩選檢 測(cè)，沒有定量標(biāo)準(zhǔn)。因此dPCR方法相比于熒光定量PCR 檢測(cè)方法同樣具有簡(jiǎn)便、高效等特點(diǎn)，對(duì)于轉(zhuǎn)基因DAS- 44406-6大豆品系的實(shí)際檢測(cè)具有很大的應(yīng)用價(jià)值。

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