組織培養(yǎng)配方研制
組織培養(yǎng)配方的研制是組培技術(shù)的關(guān)鍵,但受材料,經(jīng)驗(yàn)等因素的影響,實(shí)際生產(chǎn)中配方研究的方法千差萬(wàn)別,但總體來(lái)說(shuō)還是有章可循的,簡(jiǎn)單介紹一些常用方法,以供參考。1、配方的研制方向
1、去分化----誘導(dǎo)形成原球莖、愈傷組織、
2、再分化芽----原球莖形成植株、不定芽形成植株、胚狀體、珠莖、花芽、葉、鱗片母體組織直接產(chǎn)生小植株、無(wú)菌短枝扦插腋芽萌發(fā)
3、芽苗伸長(zhǎng)---小苗拔高,成為幼苗。
4、再分化根--- 愈傷、莖部直接生根
激素一般配比規(guī)律Skoog和Miller等所提出的生長(zhǎng)素和激動(dòng)素比例決定根和芽分化的觀點(diǎn),曾被大量的試驗(yàn)結(jié)果所證明 。因此二者的濃度和比例非常重要,其合適的配比就是常說(shuō)的配方。狹義的配方,如:MS +BA2+NAA0。2廣義的配方,如:B5 +BA2+NAA0.2+糖5g+活性碳10%+200C+瓊脂6g1。去分化:生長(zhǎng)素低;細(xì)胞分裂素高
2。再分化:細(xì)胞分裂素高;生長(zhǎng)素低
3。莖伸長(zhǎng):赤霉素調(diào)節(jié)4。生根:生長(zhǎng)素高;細(xì)胞分裂素低
1.參閱外來(lái)配方:簡(jiǎn)單實(shí)用,節(jié)省時(shí)間,較為準(zhǔn)確,效益突出。2.原配方的改造:如蘋(píng)果棗組培快繁
原分化培養(yǎng)基:MS+6 -BA4.0+NAA0.3
篩選分化培養(yǎng)基進(jìn)行試驗(yàn):以原配方BA4.0、NAA0.3為參照,設(shè)計(jì)4次重復(fù),兩兩組合,則有16種配方組合,從中篩選BA、NAA*組合。
6 -BA----2.0、3.0、4.0、6.0 mg/L
NAA-----0.05、0.1、0.3、0.5 mg/L
3.新配方的研制3.1*設(shè)計(jì)(適合因素少,水平少的試驗(yàn))正交設(shè)計(jì)
正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法----它是以概率它是以概率論數(shù)理統(tǒng)計(jì)論數(shù)理統(tǒng)計(jì)、專(zhuān)業(yè)技術(shù)知識(shí)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)為基礎(chǔ),充分利用標(biāo)準(zhǔn)化的正交表來(lái)安排試驗(yàn)方案,并對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行計(jì)算分析,zui終達(dá)到減少試驗(yàn)次數(shù),縮短試驗(yàn)周期,迅速找到優(yōu)化方案的一種科學(xué)計(jì)算方法。
我國(guó)從我國(guó)從20世紀(jì)世紀(jì)50年代開(kāi)始,以*數(shù)學(xué)研究所為基礎(chǔ)深入研究這門(mén)科學(xué),并應(yīng)用到工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中去,得到了廣泛推廣成績(jī)顯著。正交法之所以受到人們的關(guān)注正交法之所以受到人們的關(guān)注。
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