在顯微鏡下,由于某些物質(zhì)的光學(xué)特性,普通正置顯微鏡不能看清楚其內(nèi)部結(jié)構(gòu),而其擁有另外一種特性,比如細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,利用這種物質(zhì)的光學(xué)特性,研發(fā)出了專業(yè)的顯微顯示設(shè)備,即熒光顯微鏡。熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具。熒光顯微鏡的準(zhǔn)確定義是指選擇由高壓汞燈或類似光源發(fā)出的一定波長(zhǎng)的激發(fā)光,激發(fā)細(xì)胞中某些被熒光染料標(biāo)記的物質(zhì)發(fā)射熒光,觀察細(xì)胞某種特異成分的分布狀態(tài)的顯微鏡。也可進(jìn)行半定量測(cè)定。熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
顯微鏡照明光路系統(tǒng)的調(diào)整是為了使顯微鏡的視野能受到均勻而又充分的照明,在顯微鏡初次安裝和調(diào)試時(shí),就必須把照明光路系統(tǒng)調(diào)整好,這是正確使用顯微鏡,并獲得正確、可靠結(jié)果的重要手段和zui基本的要求。此外,正確掌握照明光路系統(tǒng)的調(diào)整,是使用顯微鏡過(guò)程中更換光源燈泡后所必經(jīng)的步驟,也是在日常使用過(guò)程中不時(shí)地檢驗(yàn)顯微鏡性能的必要手段。熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別:
1.照明方式通常為落射式,即光源通過(guò)物鏡投射于樣品上;
2.光源為紫外光,波長(zhǎng)較短,分辨力高于普通顯微鏡;
3.有兩個(gè)特殊的濾光片,光源前的用以濾除可見(jiàn)光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護(hù)人目。
熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種,主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。
熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。其被廣泛的運(yùn)用在生物學(xué)、醫(yī)藥研究領(lǐng)域。
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