色譜柱常見(jiàn)問(wèn)題解答
溶解性不好的樣品
如果樣品不溶于流動(dòng)相中的有機(jī)溶劑怎么辦,按照化學(xué)合成人員的溶解性測(cè)試,的確有些樣品不能*溶解在甲醇或者乙腈中,可是對(duì)于分析測(cè)試用的樣品濃度來(lái)說(shuō),樣品不太可能不溶于相同的溶劑中。如果樣品在分析用濃度水平不能溶解的話,它怎么能在分析過(guò)程中從色譜柱上被洗脫出來(lái)呢?對(duì)于極少數(shù)情況,樣品在水-有機(jī)溶劑中的臨界濃度對(duì)其溶解性很重要。但是對(duì)于好的液相色譜系統(tǒng),比較傾向樣品溶解在流動(dòng)相中,并會(huì)被流動(dòng)相洗脫出來(lái)。大多數(shù)色譜柱的清洗方法關(guān)注的不是樣品如何從色譜柱洗脫下來(lái),而是如何將樣品所帶來(lái)的污染物從色譜柱上清洗掉,那么采用強(qiáng)溶劑將是選擇。
可以采取強(qiáng)溶劑沖洗嗎
有些色譜工作者喜歡用一些洗脫能力比流動(dòng)相中強(qiáng)溶劑更強(qiáng)的溶劑來(lái)清洗色譜柱,例如,在用乙腈沖洗色譜柱后,采用二氯甲烷或甲基叔丁基醚或者DMSO沖洗。的確這樣做可以出去一些強(qiáng)吸附在色譜柱上的污染物,但有時(shí)要考慮值不值得。我們從經(jīng)濟(jì)的角度考慮一下:對(duì)于制藥行業(yè)來(lái)說(shuō),一般一個(gè)LC-UV的分析大約要花費(fèi)50美元。如果一個(gè)價(jià)值500美元的色譜柱可以持續(xù)運(yùn)行500次進(jìn)樣的話,那么每一次進(jìn)樣花費(fèi)1美元,是全部花費(fèi)的2%。如果你用1小時(shí)來(lái)清洗色譜柱,并使其壽命延長(zhǎng)一倍的話,你也只是節(jié)約全部費(fèi)用的1%,這是一種很好的投資嗎?我覺(jué)得如果一根色譜柱可以進(jìn)樣500次的話,就已經(jīng)很值了。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),即使是血樣樣品,色譜柱常常能經(jīng)受2000次進(jìn)樣或者更多。色譜柱是消耗品,不是固定資產(chǎn),即使它非常貴也仍然是耗材
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