紫外可見分光光度計簡介1852年,比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液層厚度相等時,顏色的強(qiáng)度與呈色溶液的濃度成比例,從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ),這就是的比爾朗伯定律。1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域,并且設(shè)計了*臺比色計。到1918年,美國國家標(biāo)準(zhǔn)局制成了*臺紫外可見分光光度計。此后,紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進(jìn),又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高,其應(yīng)用范圍也不斷擴(kuò)大。
]從儀器理論上講,各種紫外可見分光光度計,都是根據(jù)比耳定律設(shè)計的;而比耳定律研究的是在平行光、單色光的條件下,物質(zhì)對光的吸收。但是,紫外可見分光光度計的單色器不可能得到真正的單色光。并且,單色器系統(tǒng)不同,它產(chǎn)生的單色光的純度(光譜帶寬)也不同,并且光通過物質(zhì)時,也不可能是真正的平行光。因此,嚴(yán)格地說,實際工作中,任何紫外可見分光光度計,都不可能真正滿足比耳定律。所以,紫外可見分光光度計都是針對近似平行光、近似單色光的條件設(shè)計的。所以,就看誰設(shè)計、制造儀器zui能滿足或接近比耳定律(或產(chǎn)生的比耳定律的偏離zui?。?,誰的儀器到了使用者手里,由于非平行光或非單色光產(chǎn)生的分析誤差zui小,誰的儀器就(當(dāng)然還有雜散光、噪聲、穩(wěn)定性等要求)。這就是從儀器學(xué)理論,去看紫外可見分光光度計的設(shè)計、制造誤差的zui根本、zui本質(zhì)的問題;也是使用者從儀器學(xué)理論去看紫外可見分光光度計的分析誤差的zui根本、zui本質(zhì)的問題
紫外可見分光光度計主要應(yīng)用
1檢定物質(zhì)
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是zui大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的zui大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
2與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)*一致。如果沒有標(biāo)樣,也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確,精密度高,且測定條件要相同。
3比較zui大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
4純度檢驗
5推測化合物的分子結(jié)構(gòu)
6氫鍵強(qiáng)度的測定
實驗證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度,以確定選擇哪一種溶劑。
7絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
8反應(yīng)動力學(xué)研究
9在有機(jī)分析中的應(yīng)用
有機(jī)分析是一門研究有機(jī)化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學(xué),它是在有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。