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島津LC-2010A型液相色譜儀操作規(guī)程

1、目的
規(guī)范島津LC-2010A型液相色譜儀的使用。
2、范圍
適用于島津LC-2010A型液相色譜儀的使用。
3、規(guī)程
3.1 系統(tǒng)組成
本系統(tǒng)由容器箱、 自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)部、輸液部、柱溫箱、系統(tǒng)控制器、Easy3000工作站和電腦等組成。
3.2 準(zhǔn)備
3.2.1 準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相，用合適的0.45μm濾膜過(guò)濾，超聲脫氣至少20min。
3.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱（注意方向）。
3.2.3 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時(shí)配制），用0.45μm濾膜過(guò)濾。
3.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。
3.3 開(kāi)機(jī)
接通電源，按下系統(tǒng)控制器面板上的電源開(kāi)關(guān) 上托畫(huà)面上顯示要輸入Login Pass-ID-No的對(duì)話框，輸入00000后，按 [OK] 顯示Menu畫(huà)面，
選擇Method畫(huà)面，在Method畫(huà)面進(jìn)行相關(guān)參數(shù)設(shè)定，然后打開(kāi)電腦顯示器、主機(jī)，zui后打開(kāi)色譜工作站。
3.4 參數(shù)設(shè)定
3.4.1 波長(zhǎng)設(shè)定 在Method畫(huà)面上，將光標(biāo)置于UV-VIS檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)定的欄內(nèi)，用數(shù)字鍵輸入所需波長(zhǎng)值，按[Enter]鍵確認(rèn)。
3.4.2 流速設(shè)定 在Method畫(huà)面上，將光標(biāo)置于流量設(shè)定的欄內(nèi)，用數(shù)字鍵輸入所需的流量（柱在線時(shí)流量一般不超過(guò)1ml/min），按[Enter]鍵確認(rèn)。
3.4.3 流動(dòng)相比例設(shè)定 在Method畫(huà)面上，將光標(biāo)置于流動(dòng)相混合比率設(shè)定的欄內(nèi)，在A-D上，用數(shù)字鍵輸入所需流動(dòng)相的混合比率，按[Enter]鍵確認(rèn)。
3.4.1 柱溫設(shè)定 在Method畫(huà)面上，將光標(biāo)置于柱溫箱溫度設(shè)定欄，用數(shù)字鍵輸入柱溫箱所需的溫度，按[Enter]鍵確認(rèn)。
3.5 更換流動(dòng)相并排氣泡
3.5.1 將管路的吸濾器放入裝有準(zhǔn)備好的流動(dòng)相的儲(chǔ)液瓶中；
3.5.2 逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)泵的排液閥180°，打開(kāi)排液閥；
3.5.3 在Method畫(huà)面上，按[purge]鍵 顯示清洗設(shè)定的上托畫(huà)面，pump鍵旁的綠指示燈亮，*開(kāi)始工作。
3.5.4 依次按下使用的流動(dòng)相通道和沖洗液通道的功能鍵，即流路A
、流路B 、流路C 、流路D 及自動(dòng)進(jìn)樣的沖洗液
，泵大約以8ml/min的流速?zèng)_洗，清洗完成后自動(dòng)停止。
3.5.5 將排液閥順時(shí)針旋轉(zhuǎn)到底，關(guān)閉排液閥。
3.5.6 如管路中仍有氣泡，則重復(fù)以上操作直至氣泡排盡。
3.5.7 如按以上方法不能排盡氣泡，從柱入口處拆下連接管，放入廢液瓶中，設(shè)流速為5ml/min，按[pump]鍵，沖洗3min后再按[pump]鍵停泵，重新接上柱并將流速重設(shè)為規(guī)定值。
3.6 平衡系統(tǒng)
3.6.1 按《Easy3000色譜數(shù)據(jù)工作站操作規(guī)程》打開(kāi)“Easy3000色譜工作站”軟件，輸入實(shí)驗(yàn)信息并設(shè)定各項(xiàng)方法參數(shù)后，等待系統(tǒng)平衡。
3.6.2 等度洗脫方式
3.6.2.1 按泵的[pump]鍵，泵啟動(dòng)，pump指示燈亮。用檢驗(yàn)方法規(guī)定的流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)，一般zui少需6倍柱體積（約30min）的流動(dòng)相。
3.6.2.2 檢查各管路連接處是否漏液，如漏液應(yīng)予以排除。
3.6.2.3 觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動(dòng)應(yīng)不超過(guò)1MPa。如超過(guò)則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡，按3.5.6操作。
3.6.2.4 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min，噪聲為<0.001mV時(shí)，可認(rèn)為系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài)，可以進(jìn)樣。
3.6.3 梯度洗脫方式
3.6.3.1 以檢驗(yàn)方法規(guī)定的梯度初始條件，按3.6.2項(xiàng)下方法平衡系統(tǒng)。
3.6.3.2 在進(jìn)樣前運(yùn)行1~2次空白梯度。方法：具體操作詳見(jiàn)LC-2010A操作說(shuō)明書(shū)34頁(yè)3.4.6梯度洗脫的設(shè)定。
3.7 進(jìn)樣
3.7.1 進(jìn)樣前按檢測(cè)器[zero]鍵調(diào)零，按軟件中 [零點(diǎn)校正] 按鈕校正基線零點(diǎn)。
3.7.2 按下系統(tǒng)控制器面板上的Run鍵，系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)樣。
3.8 清洗柱及進(jìn)樣系統(tǒng)和關(guān)機(jī)
3.8.1數(shù)據(jù)采集完畢后，關(guān)閉檢測(cè)器，繼續(xù)以工作流動(dòng)相沖洗20min后，（如流動(dòng)相含緩沖鹽，換為不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相在沖洗20min），再換用純水沖洗系統(tǒng)及色譜柱至少60min，zui后用甲醇或乙腈沖洗至少30min。
3.8.2 沖洗完柱后，將整個(gè)流路都置于有機(jī)溶劑中，按3.5.4清洗整個(gè)流路及進(jìn)樣系統(tǒng)。
3.8.3 清洗完成后，先將流量降到0，關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)。
3.8.4 每次實(shí)驗(yàn)完畢，均需更換循環(huán)瓶中的水。
3.8.5 認(rèn)真填寫(xiě)儀器使用記錄。