大鼠CD44分子（CD44）ELISA Kit上海素爾生物科技有限公司提供，1-2個工作日發(fā)貨，提供免費(fèi)代測服務(wù)，收到標(biāo)本起一周內(nèi)提供原始數(shù)據(jù)和zui終數(shù)據(jù)，提供ELISA各種樣本收集、處理、保存方法，歡迎您致電咨詢庫存狀態(tài)，售后說明等。

大鼠CD44分子(CD44)ELISA Kit上海素爾生物為您傾情供應(yīng)，**技術(shù)，嚴(yán)格工藝流程，*抗體/抗原，嚴(yán)格QC檢測后方可出庫，請放心購買！致電：，！ 

中文名稱：Rat cluster Of differentiation,CD44 ELISA Kit

英文名稱：大鼠CD44分子(CD44)ELISA Kit

儲存溫度：：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻繁使用時)

有效期：6個月

產(chǎn)品供應(yīng)商：上海素爾生物科技有限公司

1-2個工作日發(fā)貨，提供免費(fèi)代測服務(wù)，收到標(biāo)本起一周內(nèi)提供原始數(shù)據(jù)和zui終數(shù)據(jù)

ELISA各種樣本收集、處理、保存方法

1. 血清標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，全血標(biāo)本室溫放置1－2 h或4℃過夜，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

2. 血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法：

根據(jù)樣本要求選擇EDTA或*或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的*或離心管采集血液標(biāo)本，室溫混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

3. 尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用干凈容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

4. 唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法：

用干凈離心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:

（1）細(xì)胞培養(yǎng)上清

 取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

細(xì)胞裂解液

收集細(xì)胞培養(yǎng)液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，棄去上清，用預(yù)冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細(xì)胞。通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，除去細(xì)胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

6. 植物標(biāo)本收集、處理、保存方法：

取適量大小組織塊（一般0.2－0.5 g），用預(yù)冷的PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，濾紙拭干水分。準(zhǔn)確稱重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質(zhì)（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS緩沖液）于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機(jī)器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

7. 糞便標(biāo)本收集、處理、保存方法：

采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4），攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

8. 組織標(biāo)本收集、處理、保存方法：

將組織樣本用PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。將組織塊稱重，記錄后剪碎（碎塊盡量小）。將組織按一定的比例（通常組織重量：PBS體積=1：9）加入預(yù)冷的PBS緩沖液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）中勻漿，勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中，4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復(fù)凍融。

大鼠CD44分子(CD44)ELISA Kit

1．ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完， 板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

試劑盒靈敏度、精密度、穩(wěn)定性

1. 靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力；2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。 

2. 特異性：常用交叉反應(yīng)率表示。其越高說明特異性越好。 

3. 精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍

4. 穩(wěn)定性：試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存，定期測定其靈敏度，特異性和精密度等指標(biāo)，直到其質(zhì)量指標(biāo)開始下降為止，通常認(rèn)為37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10℃保存一個半月。 

5. 簡便性：指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性試驗中結(jié)果判斷簡單明了，定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。

6. 安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。 

7. 經(jīng)濟(jì)性：試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本而市場價格比較合理。 

試劑評價：需要有的確證方法確證的樣品進(jìn)行檢測，一般實驗室不易取得此類樣品，每新購進(jìn)一次試劑評價也很麻煩?？梢酝ㄟ^間接的回收實驗對試劑進(jìn)行選擇

ELISA試劑盒常見問題及分析

問題分析

若試驗效果不好，請及時對顯色結(jié)果拍照，保留未用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后我公司為你解決問題。同時您也可以參考以下資料：

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*個主要的參數(shù)是洗滌量。自動洗板機(jī)會分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景，那么不要猶豫，將洗滌量調(diào)為高，是比包被體積更高。太少的洗滌液會讓一部分分析表面洗滌不到，從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。ELISA板的制造商通常會在試劑盒的使用手冊中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200µl。如果你的試劑盒也是這樣，那么制造商可能會建議使用300µl洗滌液進(jìn)行洗滌，以便清潔整個反應(yīng)孔的壁。一般來說，洗滌量越高，則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。

第二個影響洗滌效果的主要參數(shù)是洗滌循環(huán)的量。當(dāng)然，洗滌次數(shù)越多，背景越低。然而，太多次的洗滌會降低信號強(qiáng)度，使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過，ELISA板的制造商會對洗滌次數(shù)提出建議。一般而言，制造商包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少。對于用戶包被的ELISA板，必須優(yōu)化洗滌次數(shù)?？刂葡礈炝亢拖礈齑螖?shù)的另一種方法是加入過量的洗滌液。一般來說，96孔板的每個孔能容納330至460 µl。不過，有些自動化洗板機(jī)可設(shè)置程序，分配遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出這個量的洗滌液，比如1 ml。它是如何做到的呢？其實很簡單，就是在分液的同時打開吸液功能。換句話說，隨著分液器分配更多的液體，抽吸器也將液體吸出。這種技術(shù)能增加洗滌量，但不會溢出到其他孔中。

另外，還有一些參數(shù)會影響洗滌步驟的效果。這些參數(shù)包括吸液高度和吸入位置，這兩者都能調(diào)整，以降低背景（殘留量）和差異。殘留液體中包含未結(jié)合的抗原或抗體，它們會增加背景信號。殘留量越小，殘留液體越少，轉(zhuǎn)移到下一步的干擾液體也就越少。吸液高度會明顯影響殘留量；如果洗滌吸頭與反應(yīng)孔底部的距離稍大，那就會讓殘留量急劇增加。反之，如果洗滌吸頭壓著反應(yīng)孔底部，那么也會使吸液效率降低，殘留量增加。目前的洗板機(jī)一般使用兩種類型的洗頭：剛性和浮動。浮動洗頭中的吸頭可在洗滌過程中自由上下移動，而剛性洗頭則固定在適當(dāng)?shù)奈恢?。使用剛性洗頭的洗滌操作在優(yōu)化起來更為復(fù)雜，因為你需要非常仔細(xì)地調(diào)整吸液高度。如果你們實驗室使用幾種不同的板，那可能會很耗時。在使用浮動洗頭時，吸頭會降到反應(yīng)孔的底部。調(diào)整高度就不是很重要，因此洗頭會下降到底部。抽吸的位置也對殘留量有著重要影響；如果每個孔只使用一個抽吸點(diǎn)（這很常見，因為更快），那么抽吸的位置需要優(yōu)化。*的位置取決于洗頭的性狀，但它幾乎不在反應(yīng)孔的中間，即使這是所有洗頭zui常見的默認(rèn)位置。一般來說，*位置在孔中間與孔壁之間的某處。反應(yīng)孔的形狀也會影響殘留量。C形底（平底圓角）的微孔板一般會比那些平底尖角的微孔板殘留量更低。如果沒有自動洗板機(jī)，采用手工洗滌，那么也需要注意幾點(diǎn)。使用8道或12道微量移液器，采用倒吸的方法進(jìn)行洗滌；不同廠家的洗液不宜相互混用。洗板時需保證微孔板平放，將洗滌液注滿各孔，但盡量避免漏液溢液，以每孔300 µl為宜；板洗次數(shù)一般為3次，要保證洗板的浸泡時間，每次浸泡時間一般為30-60 秒；盡量減少洗液殘留量，*每次洗板后進(jìn)行拍板，并及時更換吸水紙，避免吸水紙的碎屑粘到反應(yīng)孔內(nèi)。

大鼠CD44分子(CD44)ELISA Kit看起來很簡單，但是在實際操作過程中，也不能掉以輕心，還是應(yīng)該仔細(xì)檢查洗滌步驟，才能獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。