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小鼠*(VC)ELISA試劑盒檢測說明書

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詳細信息 在線詢價

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<strong><strong><strong><strong><strong><strong><strong><strong><strong>小鼠*(VC)ELISA試劑盒檢測說明書</strong></strong></strong></strong></strong></strong></strong></strong></strong>

小鼠*(VC)ELISA試劑盒檢測說明書

 

【信息說明】

中文名:小鼠*(VC)ELISA試劑盒

中文別名:小鼠*(VC)ELISA  Kit

供應商:上海古朵

規(guī)格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6個月

樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。

用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。

種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

 

【性能優(yōu)點】

1、專一性強。抗原與抗體的免疫反應是專一反應,而免疫酶技術(shù)以免疫反應為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。

2、靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。

3、樣品易保存。經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。

4、結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。

5、可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應用酶免吸附技術(shù)進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術(shù)的定量測定。

6、可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。

7、儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置。

 

【操作步驟】

1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 

2、酶標板置4℃,包被過夜。

3、洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

4、陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

5、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 

6、洗板,同(4)。 

7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

8、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 

9、洗板,同(4)。 

10、每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 

11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 

12、分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

13、數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

 

【注意事項】

1、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

2、試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

3、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。  

5、洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

7、加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

8、按照小鼠*(VC)ELISA試劑盒檢測說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

9、底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子;底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下;避免用手接觸,有毒;實驗完成后應立即讀取OD值。

 

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標簽:小鼠*(VC)ELISA試劑盒     小鼠*(VC)ELISA檢測試劑盒


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