小鼠*（VC）ELISA試劑盒檢測說明書由上海古朵生物提供，同時為您詳細介紹了相關(guān)ELISA試劑盒說明書，品牌，價格，特點，用途等資訊，別名：小鼠*（VC）ELISA Kit，試劑盒成分：酶標板，試劑，標準品等。用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。特點：敏感性高、特異性強。

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小鼠*(VC)ELISA試劑盒檢測說明書

【信息說明】

中文名：小鼠*(VC)ELISA試劑盒

中文別名：小鼠*(VC)ELISA  Kit

供應商：上海古朵

規(guī)格：48t/96t

保存：2~8℃

有效期：6個月

樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。

用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。

種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

【性能優(yōu)點】

1、專一性強。抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術(shù)以免疫反應為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。

2、靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

3、樣品易保存。經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

4、結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。

5、可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應用酶免吸附技術(shù)進行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術(shù)的定量測定。

6、可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。

7、儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置。

【操作步驟】

1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 

2、酶標板置4℃，包被過夜。

3、洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

4、陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

5、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

6、洗板，同（4）。 

7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

8、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

9、洗板，同（4）。 

10、每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 

11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 

12、分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

13、數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

【注意事項】

1、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

2、試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

3、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。  

5、洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

7、加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

8、按照小鼠*(VC)ELISA試劑盒檢測說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

9、底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子；底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下；避免用手接觸，有毒；實驗完成后應立即讀取OD值。

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