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人胰淀素(Amylin)ELISA檢測試劑盒

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  【信息說明

  中文名:人胰淀素(Amylin)ELISA檢測試劑盒

  中文別名:人胰淀素(Amylin)ELISA Kit

  英文名:Human Amylin ELISA KIT ELISA Kit

  供應(yīng)商:上海古朵

  保存條件:2-8℃低溫保存

  保質(zhì)期:6個(gè)月

  試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。ELISA試劑盒檢測范圍:人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動(dòng)物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、骨代謝、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。

  適用范圍:主要用于科研方面,不用于臨床診斷。

  檢測類型:雙抗體夾心法測抗原、雙抗原夾心法測抗體、間接法測抗體、競爭法測抗體、競爭法測抗原、捕獲包被法測抗體、ABS-ELISA法。

 

  【組成說明

  1、預(yù)包被板: 96T/48T

  2、酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1

  3、標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2

  4、EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

  5、標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

  6、顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

  7、終止液: 1N硫酸 12mL x 1

  8、濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1

 

  【洗板方法

  1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將*的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

  2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。

  說明:

  1、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。

  2、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

  3、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

  4、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

  5、有效期:6個(gè)月。

  6、電子版說明書僅供參考,實(shí)際操作請(qǐng)按照隨產(chǎn)品發(fā)送的印刷版說明書;中英文說明書可能會(huì)有不*的地方,以英文說明書為準(zhǔn)。

 

  【組織機(jī)構(gòu)

  1、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

  2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

  3、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

  4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

  5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

  【操作步驟

  1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

  2、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

  3、配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

  4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

  5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

  6、溫育:操作同3。

  7、洗滌:操作同5。

  8、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

  9、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

  10、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

  【注意事項(xiàng)

  1、請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

  3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

  4、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6、底物請(qǐng)避光保存。

  7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

  8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

  9、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

 

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