PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可以馬上得到定量結(jié)果,無需凝膠電泳分析,無需純化PCR產(chǎn)物,無需進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)操作。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting或RNase-protection assays相比,7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)具有時(shí)間省,靈敏度高,準(zhǔn)確性好和線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。
ABI 7500 型快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀 主要應(yīng)用
基于相對定量分析的基因表達(dá)分析
以標(biāo)準(zhǔn)曲線為基礎(chǔ)的病原體決對定量分析
定性的PCR擴(kuò)增后核酸序列的SNP基因型分析
以陽性內(nèi)對照為基礎(chǔ)的陽性/陰性結(jié)果判定
儀器性能
7500型快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)經(jīng)過驗(yàn)證可以達(dá)到如下性能指標(biāo):
9個(gè)數(shù)量級的線性范圍;
可以檢測20 μL反應(yīng)體積單一報(bào)告熒光TaqMan®實(shí)驗(yàn)中僅10個(gè)起始拷貝數(shù)的模板,其可置信度高達(dá)99.7%。
ABI 7500 型快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀 軟件特點(diǎn):
●反應(yīng)板設(shè)置指南軟件使實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)非常簡單,包括復(fù)雜的多色熒光實(shí)驗(yàn);
●可選擇快速、標(biāo)準(zhǔn)或者9600反應(yīng)模式;
●實(shí)時(shí)監(jiān)測擴(kuò)增曲線;
●實(shí)驗(yàn)過程中可以增加PCR循環(huán)數(shù);
●自動(dòng)設(shè)置熒光基線,自動(dòng)計(jì)算熒光閾值使數(shù)據(jù)分析大大簡化;
●可在同一反應(yīng)板采用多種標(biāo)準(zhǔn)曲線對靶基因進(jìn)行對定量,可以簡化工作流程以及下游產(chǎn)物分析;
●基因表達(dá)相對定量軟件提供強(qiáng)大的結(jié)果分析顯示,可以自動(dòng)將多達(dá)10塊96孔板基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)同時(shí)分析,并自動(dòng)去除無關(guān)項(xiàng)數(shù)據(jù);
●自動(dòng)SNP分析軟件可以簡單直觀的圖表輸出分型結(jié)果并自動(dòng)進(jìn)行分型質(zhì)量評分;
●解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單,觀察方便,可以在儀器運(yùn)行時(shí)觀察解離曲線數(shù)據(jù);
●觀察實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線時(shí)可以非常方便的標(biāo)定所對應(yīng)的樣品孔位置;
●光源使用時(shí)間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序。