單增李斯特氏菌驗證培養(yǎng)基
（ L. mono Confirmatory HiVeg™ Agar Base）
貨號 | 產(chǎn)品 | 原裝品名 | 規(guī)格 | 貨期 | 儲存 | 效期 |
MV1552 | 單增李斯特氏菌驗證培養(yǎng)基 | L. mono Confirmatory HiVeg™ Agar Base | 100g(1.29L) 500g（6.49L） | 4-6周 | 30°C以下 | 見外包裝 |
FD212-5VL | 添加劑1 | L. mono Selective Supplement I | 5管(2.5L) | 4-6周 | 2-8°C | 見外包裝 |
FD213-5VL | 添加劑2 | L. mono Selective Supplement II | 5管(2.5L) | 4-6周 | 2-8°C | 見外包裝 |
FD227-5VL | 添加劑3 | L. mono Enrichment Supplement II | 5管(2.5L) | 4-6周 | -20°C | 見外包裝 |
應(yīng)用
*用于從臨床樣本和食品樣本中選擇鑒別性分離單核細胞增生李斯特菌。
原理和說明
單增李斯特氏菌驗證培養(yǎng)基采用了無瘋牛病/傳染性海綿腦病風(fēng)險的植物源特別蛋白胨，用于取代動物源的特別蛋白胨。單核細胞增生李斯特氏菌是一種革蘭氏陽性食物致病菌。它可造成孕婦嚴重感染，終導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、新生兒李斯特氏菌病和腦膜炎，或成人和青少年原發(fā)性菌血癥。
單核細胞增生李斯特氏菌同其他李斯特氏菌種的鑒別，是依據(jù)磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C（PIPLC）活性（1,2）和α-甲基-D-甘露糖苷的發(fā)酵。磷脂酶C是一種重要的毒力因子，只有單核細胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌具有。單核細胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌水解培養(yǎng)基中的底物（FD227），菌落周圍產(chǎn)生不透明的光暈。單核細胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌之間的鑒別是通過觀察α-甲基-D-甘露糖苷的發(fā)酵。單核細胞增生李斯特氏菌發(fā)酵α-甲基-D-甘露糖苷，在菌落周圍產(chǎn)生黃色光暈。伊氏李斯特氏菌不發(fā)酵α-甲基-D-甘露糖苷，菌落周圍也沒有黃色光暈。
培養(yǎng)基中的特殊蛋白胨、胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供含氮物質(zhì)、*復(fù)合物和其他必需的營養(yǎng)成分。鼠李糖為發(fā)酵糖，酚紅為指示劑。氯化鈉維持滲透壓平衡。氯化鋰和添加劑1（FD181）抑制大多數(shù)革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌和霉菌生長。磷脂酶C水解添加劑2（FD214），通過在單增李斯特菌菌落周圍產(chǎn)生不透明的光環(huán)，用以證明PIPLC活性的存在。
培養(yǎng)基組分
成分 克/升
HiVeg特別蛋白胨 30.00
酵母膏 6.00
氯化鈉 5.00
氯化鋰 10.00
無水* 2.50
B.C.指示劑 8.60
α-甲基-D-甘露糖苷 3.00
瓊脂 12.00
終pH（25） 7.2±0.2
配置
稱量38.50g干粉溶于 470ml蒸餾水。加熱使全溶。15磅（121℃）滅菌15分鐘。冷卻至45-50℃。無菌添加復(fù)溶的選擇性添加劑1（貨號FD212）和添加劑2（貨號FD213）各1管、增菌添加劑II(貨號FD227)1管?；靹虿A注無菌平皿中。
警告：氯化鋰是有害的。避免身體接觸和吸入蒸氣。一旦與皮膚接觸，應(yīng)用大量水沖洗。
質(zhì)量控制
外觀：粉棕色均一自由流動粉末。
成膠性：牢固，與1.2％瓊脂凝膠相當(dāng)。
成品顏色和透明度：紫色的不透明凝膠。
配比濃度：25℃時，7.7%水溶液（7.7g干粉/100ml蒸餾水）pH值為7.20±0.2
培養(yǎng)反應(yīng)
加入3種添加劑后35-37℃孵育24-48小時，觀察培養(yǎng)菌落特征
菌株（ATCC） | 接種（CFU） | 生長 | 回收率 | 菌落顏色 | PIPLC活性 |
白色念珠菌（10231） | 102-103 | 抑制 | 0% | - | - |
糞腸球菌（29212） | 102-103 | 抑制 | 0% | - | - |
大腸桿菌（25922） | 102-103 | 抑制 | 0% | - | - |
英諾克李斯特菌（33090） | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 黃色 | - |
格氏李斯特氏菌（19120） | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 黃色 | - |
伊氏李斯特菌（19119） | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 淡紫色 | + |
單核細胞增生李斯特氏菌（19118） | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 黃色 | + |
斯氏李斯特氏菌 | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 淡紫色 | - |
威氏李斯特氏菌 | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 黃色 | - |
1. 單核細胞增生李斯特氏菌
2. 伊氏李斯特菌
3. 英諾克李斯特菌
4. 斯氏李斯特氏菌
參考文獻
1. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.
2. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceedings p.6, A.D.R.I.A. Quimper, France, 16-18 June 1997.
