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60107-419 美國賽默飛熱電Retain-AX SPE 色譜柱

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Thermo Scientific HyperSep Retain-AX SPE 色譜柱以具備用于保留酸性化合物的多用途聚合物材料為特色。

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網(wǎng)上對柱子是否可以反沖一直有爭論,那什么樣的柱子可以反沖,什么不可以。反沖后是正者用,還是反著用。具體到各型號柱子不僅是ODS柱,其他如,正向柱、氨基柱、離子交換柱等都有解釋。

答:一般的正相反相柱應該都能反沖,只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖,不過目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉,反沖后還是正著用比較好,以免柱子的兩頭都被污染,我們一直提倡的是:正向使用,反向沖洗。

 

2.我在做方法開發(fā)的時候,用乙腈和水作為流動相,在調整梯度的時候發(fā)現(xiàn),剛開始60%乙腈,RT2.5分鐘調到40%乙腈,RT沒有變化30%也沒有變化,一直調到20%的時候,RT突然變到了約13分鐘請問這是什么原因?我用的是離子交柱。

答:離子交換柱的保留時間主要由洗脫液的離子強度和pH決定,你現(xiàn)在講的比較簡單,需要把你的方法說的詳細一點才能做具體的分析。譬如,分析物是什么情況,其含有極性電離基團和非極性基團是什么性質?離子交換柱是聚合物基質還是硅膠基質?水相是什么緩沖鹽?

 

3.對于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的時候應該怎樣進行活化及維護?為什么要這樣做?

答:新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡,特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為,分子量高的物質分子,擴散速度慢,平衡所需時間也相應較長。具體平衡方式也很簡單,多進幾次樣品,直到峰面積和保留時間穩(wěn)定,再進行正式進樣測定。

如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續(xù)進樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是:將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。

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