總IgE檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
ELISA操作顯色過程常見問題及解答
1） 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2） 使用變質(zhì)的顯色劑。
3） 未使用完畢的顯色劑返回原瓶造成污染
4） 顯色反應(yīng)不避光，或有陽光直射
解決辦法：
1） 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用；
2） A、B 液應(yīng)避免接觸金屬器械。
3） 使用量根據(jù)樣本需要量取，取出后未使用完畢的顯色液應(yīng)棄去，不能再次返回原試劑瓶，以免造成顯色液污染，影響下次使用；
4） TMB對光敏感，一般顯色反應(yīng)要避光進行；
通用名稱：總IgE檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Total- IgE ELISA
產(chǎn)品貨號：RE59061
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測樣本：血清和血漿
公司品牌：德國IBL
儲存條件：2-8℃
檢測方法：ELISA方法
預(yù)期用途：可用于定量人檢測血清、血漿中總的IgE抗體的含量
參考價格：詢價
供應(yīng)商家：深圳市科潤達生物工程有限公司
總IgEELISA試劑盒預(yù)期用途
總IgE檢測試劑盒可用于定量人檢測血清、血漿中總的IgE抗體的含量?？蛇M一步應(yīng)用與其他體液的檢測，如有需要請聯(lián)系IBL的技術(shù)人員。
IgE簡介
人體中的IgE是一種特殊的免疫球蛋白，它是過敏反應(yīng)的一種重要介導(dǎo)因素。反應(yīng)的機制涉及到免疫活性的B淋巴細胞被特異性抗原所造成的抗原刺激。之后淋巴細胞產(chǎn)生幾種類型的抗體，其中IgE抗體通過它的FC部分結(jié)合到肥大細胞以及嗜堿性白血球的表面受體上，再次接觸到過敏原時，細胞表面綁定的IgE就會通過它們的Fab部分與過敏原結(jié)合。這一結(jié)合會引起肥大細胞以及嗜堿性白血球釋放各種血管活性胺到血液以及周邊組織中去。這些物質(zhì)會引起平滑肌收縮并導(dǎo)致水痘、潮紅、麻疹、鼻炎、皮炎、花粉熱、哮喘以及過敏性休克。IgE檢測可有效的用于診斷已知或懷疑患有過敏性疾病的病人。正常情況下，IgE的值與年齡有關(guān)，并且在10-14歲急劇增加。有家族遺傳性過敏疾病的嬰兒及兒童有很高的風(fēng)險會患有疾病，因此他們是主要的篩查對象。研究顯示哮喘、鼻炎、濕疹、蕁麻疹、皮炎以及一些蟲感染都有可能增加IgE水平。哮喘、花粉熱以及特異性濕疹病人會比正常病人IgE水平高出3-10倍。
總IgEELISA試劑盒檢測原理
總IgE檢測試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附法。微孔板上包被有單克隆的小鼠抗人IgE抗體。病人血清以及標(biāo)準(zhǔn)品加入到微孔中后，與之后加入的抗人IgE辣根過氧化酶結(jié)合物一同孵育。后血清中的IgE與兩種抗體形成夾心復(fù)合物。洗板后加入TMD底物液孵育15分鐘，之后加入終止液顯出黃色。之后在450nm讀取吸光值，結(jié)果會與IgE濃度成正比。
總IgE檢測試劑盒檢測步驟
●選取好足夠數(shù)量的板條，放置在架子上。
●每個對應(yīng)的孔中加入10μl樣品、標(biāo)準(zhǔn)品，然后每個孔加入200μl酶聯(lián)物。留一個孔做空白對照
●蓋板，在室溫下溫育30分鐘
●清空微孔，用300μl洗液洗3次
●每個孔加100μl底物液，室溫避光溫育15分鐘
●每孔加入100μl終止液
●60分鐘內(nèi)在450nm下讀數(shù)（參照波長620nm）
總IgE檢測試劑盒組成
●1×12×8——微孔板——包被有單克隆抗IgE抗體
●1×1ml-1×5×0.2ml——標(biāo)準(zhǔn)品A-F——標(biāo)準(zhǔn)品A 1mL
含量0、5、25、100、250、1000U/ml 含人血清PBS稀釋液 1%疊氮化吶
●20ml——酶聯(lián)物——羊抗IgE抗體與辣根過氧化酶結(jié)合物、蛋白緩沖液
●15ml——底物液——含TMB
●15ml——終止液——0.5M 硫酸
●60ml——洗滌液——10倍濃縮
●2 x——封板紙
●1 x——自封袋
總IgE檢測試劑盒檢測所需材料（試劑盒內(nèi)不提供）
●10μl、200μl、500μl移液器
●酶標(biāo)儀
●洗板機
●試管
●蒸餾水
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