溶組織內(nèi)阿米巴IgG檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
ELISA方法操作洗板過程常見問題及解答
1） 采用手工洗板， 孔與孔之間液體交叉。
2） 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3） 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。
解決辦法：
1） 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后*在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2） 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
3）手工洗板，每次加液后浸泡30s左右，保證洗板的效果。
通用名稱：溶組織內(nèi)阿米巴IgG檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Entamoeba histolytica IgG ELISA
產(chǎn)品貨號：RE58631
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測樣本：血清和血漿
公司品牌：德國IBL
儲(chǔ)存條件：2-8℃
檢測方法：ELISA方法
預(yù)期用途：可用于人血清或血漿（檸檬酸）中抗溶組織內(nèi)阿米巴IgG抗體的定性檢測
參考價(jià)格：詢價(jià)
供應(yīng)商家：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司
溶組織內(nèi)阿米巴IgG檢測試劑盒預(yù)期用途
溶組織內(nèi)阿米巴IgG檢測試劑盒可用于人血清或血漿（檸檬酸）中抗溶組織內(nèi)阿米巴IgG抗體的定性檢測。特別是無癥狀溶組織內(nèi)阿米巴攜帶者和再次感染溶組織內(nèi)阿米巴的鑒定。
溶組織內(nèi)阿米巴簡介
溶組織內(nèi)阿米巴是一種厭氧型的寄生蟲，會(huì)形成一個(gè)帶有4核心的直徑10-15UM的囊泡。囊泡非常的堅(jiān)固并且能抵抗不良的外界環(huán)境。當(dāng)進(jìn)入易被感染的宿主體內(nèi)后，它的外壁就會(huì)打開一個(gè)缺口，讓阿米巴暴露出來。之后阿米巴會(huì)在三個(gè)周期內(nèi)連續(xù)的分裂，形成8個(gè)分裂體。
一些分裂體就會(huì)侵入大腸組織，大范圍的腐蝕之后它們就能得以進(jìn)入血液系統(tǒng)，然后它們可以到達(dá)全身各個(gè)部位。溶組織內(nèi)阿米巴引起的疾病是性的。它是引起阿米巴病和阿米巴痢疾的病原體。它們主要寄居在大腸的腔和粘膜上（主要是橫結(jié)腸和盲腸）。
額外的，腸道阿米巴可以影響全身各個(gè)器官和組織。大多數(shù)感染者是沒有癥狀的，而這些無癥狀感染者的高發(fā)病率就使問題復(fù)雜化。那些出現(xiàn)癥狀的患者會(huì)出現(xiàn)各種各樣的癥狀。不論年齡大小和性別不同，所有人都有感染的可能性。不良的衛(wèi)生環(huán)境會(huì)時(shí)感染的可能性增加。在農(nóng)業(yè)工作者和男同性戀群體中，該疾病的流行呈現(xiàn)增長趨勢。
溶組織內(nèi)阿米巴IgG檢測試劑盒檢測原理
定性檢測抗溶組織內(nèi)阿米巴IgG抗體的此試劑盒采用ELISA的原理。微孔板的微孔中包被了溶組織內(nèi)阿米巴抗原，這些抗原可以結(jié)合樣品中相應(yīng)的抗體。洗板除去未結(jié)合的樣品，再加入辣根過氧酶標(biāo)記的蛋白A酶聯(lián)物。
加TMB后會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物，形成了可見的免疫復(fù)合物。反應(yīng)液的顏色強(qiáng)度與樣品中溶組織內(nèi)阿米巴特異性抗體的。濃度成正比。之后加入硫酸終止酶反應(yīng)，反應(yīng)液變成黃色。450nm處讀取OD值。
溶組織內(nèi)阿米巴IgG檢測試劑盒組成成分
●微孔板——12×8——包被有特異性抗原
●*——1×100ml——可用于樣品稀釋、pH7.2±0.2、黃色、白蓋、即用型
●終止液——1×15ml——含硫酸、0.2mol/l、即用型、紅蓋
●洗滌液——1×50ml——20倍濃縮、pH 7.2±0.2、白蓋
●酶聯(lián)物——1×20ml——辣根過氧化物酶標(biāo)記的蛋白A、藍(lán)色、黑蓋、即用型
●底物液——1×15ml——含TMB、黃蓋、即用型
●陽性質(zhì)控——1×2ml——黃色、紅蓋、即用型
●臨界質(zhì)控——1×3ml——黃色、綠蓋、即用型
●陰性質(zhì)控——1×2ml——黃色、藍(lán)蓋、即用型
溶組織內(nèi)阿米巴IgG檢測實(shí)驗(yàn)所需材料（但試劑盒不提供）
●移液器，10-1000 µL
●酶標(biāo)儀
●37℃溫育箱
●手動(dòng)或自動(dòng)洗板系統(tǒng)
●混合器
●去離子水
●一次性管
●計(jì)時(shí)器
溶組織內(nèi)阿米巴IgG試劑盒檢測步驟
請至少做以下幾個(gè)孔：
●1孔（例A1）做空白對照孔
●1孔（例B1）做陰性質(zhì)控
●2孔（例C1+D1）做臨界質(zhì)控
●1孔（例E1）做陽性質(zhì)控
如果有必要的話，我們建議您質(zhì)控和病人樣品做雙份檢測。照說明書給出的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作，并避免不同步驟之間的時(shí)間隔無明顯差別。加質(zhì)控品和樣品時(shí)都應(yīng)當(dāng)用新的取樣吸頭。把恒溫箱調(diào)至37±1℃
●將質(zhì)控品和稀釋好的樣品分別100µl加入到相應(yīng)的微孔中，留下A1做空白對照孔。
●蓋板。
●37±1℃下溫育1h±5分鐘
●溫育后，移去封板紙，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，用300µl洗滌液洗板3次。避免反應(yīng)孔中的液體濺出。每次洗板間的浸潤時(shí)間都應(yīng)大于5秒。后在吸水紙上拍干。
注意：洗板步驟很重要，洗板不充分將可能導(dǎo)致結(jié)果不精確或錯(cuò)誤的OD值。
●除空白孔外，在每一微孔中都加入100µl組織阿米巴蛋白A酶標(biāo)物，蓋板。
●室溫下溫育30min，避免太陽直射
●重復(fù)步驟4
●在每一微孔中加入100µlTMB底物液
●室溫下避光溫育15分鐘
●按加TMB底物液的順序和速度在每一微孔中加入100µl終止液。
溫育之后，微孔板內(nèi)試劑的顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色
注意：高陽性的病人樣品會(huì)引起染色劑沉淀。這些沉淀物會(huì)影響OD值的讀取。例如：我們建議按1：1的比例用生理鹽水預(yù)先稀釋樣品。然后按1：100的比例用稀釋液稀釋樣品，并將結(jié)果乘以2。
●加終止液后30min之內(nèi)在450/620nm處讀取OD值。
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