SFRE Medium 199是對M199培養(yǎng)基的改良，用于原代狒狒腎（Bak）細(xì)胞的生長和維持。培養(yǎng)基在M199培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了胰島素、丙酮酸鈉、硫酸鋅，并升高了*-鹽酸、半*、*、L -*、L -*、*、*、*和葡萄糖的濃度，使其實(shí)現(xiàn)大的無毒活性。SFRE 199 -2還添加了半乳糖，以避免乳酸過度積累，并使pH值在細(xì)胞延長的維持期內(nèi)，保持在生理范圍。

產(chǎn)品描述:

SFRE Medium 199是對M199培養(yǎng)基的改良，用于原代狒狒腎(Bak)細(xì)胞的生長和維持。培養(yǎng)基在M199培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了胰島素、丙酮酸鈉、硫酸鋅，并升高了*-鹽酸、半*、*、L -*、L -*、*、*、*和葡萄糖的濃度，使其實(shí)現(xiàn)大的無毒活性。SFRE 199 -2還添加了半乳糖，以避免乳酸過度積累，并使pH值在細(xì)胞延長的維持期內(nèi)，保持在生理范圍。

AT090是SFRE 199-2培養(yǎng)基，含有Earle's鹽、L-*、半乳糖和葡萄糖。它不含胰島素，因此在使用前必須單獨(dú)添加。對于不同的細(xì)胞系，建議用戶查閱相關(guān)文獻(xiàn)，以了解細(xì)胞所需的培養(yǎng)基添加成分和生理生長的需求。

培養(yǎng)基組成：

成分           mg / L

無機(jī)鹽

二水氯化鈣265.000

無水硝酸鐵0.720

無水*97.720

氯化鉀400.000

醋酸鈉50.000

氯化鈉6800.000

無水*122.000

硫酸鋅七水合物0.100

氨基酸

*100.000

羥*10.000

L-*25.000

L-*鹽酸鹽150.000

L-天冬氨酸30.000

L-半*（游離堿）4.000

L-*75.000

L-*300.000

L-*鹽酸鹽一水合物40.000

L-異*20.000

L-*60.000

L-賴氨酸鹽酸鹽70.000

L-蛋氨酸15.000

L-苯*25.000

L-*40.000

L-*25.000

L-*30.000

L-*10.000

L-*二鈉鹽116.000

L-*25.000

維生素

鈣化醇  0.100

氯化*0.500

D-*0.010

D-Ca-泛酸鹽0.010

DL-生育酚磷酸二鈉鹽0.010

*0.010

L-抗壞血酸0.050

*3 0.016

*0.025

*0.025

吡哆醛鹽酸鹽0.025

鹽酸吡哆醇0.025

*醋酸酯0.140

核黃素0.010

鹽酸硫胺素0.010

肌醇 0.050

對氨基苯甲酸（PABA）0.050

其他

硫酸腺嘌呤10.000

磷酸一腺苷1.000

三磷酸腺苷0.200

*0.200

D（+）半乳糖無水1000.000

D-葡萄糖2000.000

脫氧核糖0.500

*減少0.050

鹽酸*0.300

次黃嘌呤0.354

酚紅10.000

聚*酯80 4.900

核糖0.500

丙酮酸鈉150.000

胸腺嘧啶0.300

*0.300

黃嘌呤0.344

使用方法:

1. 將12.1g懸浮在900ml的組織培養(yǎng)級水中，持續(xù)溫和攪拌，直到粉末*溶解。不要加熱水。

2. 加入2.20g*粉末（TC230）或29.3ml的7.5％*溶液（TCL013）用于制備1L培養(yǎng)基，并攪拌至溶解。

3. 用1N HCl或1N NaOH將pH調(diào)低所需pH值的0.2-0.3 pH單位，因?yàn)檫^濾時(shí)pH值會升高。

4. 用組織培養(yǎng)級別水將終體積補(bǔ)足至1000ml。

5. 培養(yǎng)基過濾除菌。采用正壓而非真空將培養(yǎng)基通過0.22微米或更小的無菌膜過濾器。正壓可減少二氧化碳的丟失。

6. 根據(jù)需要，無菌補(bǔ)充無菌添加劑。將無菌培養(yǎng)基分裝至無菌容器中。

7. 將液體培養(yǎng)基保存在2-8°C，避光。

所需材料但未提供：

組織培養(yǎng)級水（TCL010）

*（TC230）

*溶液，7.5％（TCL013）

1N鹽酸（TCL003）

1N氫氧化鈉（TCL002）

胎牛血清（RM1112 / RM10432）

質(zhì)量控制：

外觀

灰白色至乳白色均勻粉末。

可溶性

12.1 g / L的透明溶液。

不含*的pH值

4.70-5.30

用*調(diào)節(jié)pH

7.20 -7.80

不含*的滲透壓

260.00 -300.00

含*的滲透壓

300.00 -340.00

培養(yǎng)反應(yīng)

培養(yǎng)基的促生長能力通過細(xì)胞形態(tài)分析進(jìn)行定性評估，通過細(xì)胞計(jì)數(shù)及對照品的比較進(jìn)行定量評估。細(xì)胞至少傳三代。

內(nèi)毒素含量

不超過5EU / ml

儲存和保質(zhì)期：

1.所有干粉培養(yǎng)基和制備好的液體培養(yǎng)基應(yīng)儲存在2-8°C，在效期之前使用。盡管按*條件儲存，個(gè)別干粉培養(yǎng)基在某些情況下可能會出現(xiàn)變質(zhì)/降解的跡象。這通過顏色的變化、外觀的變化、顆粒物的存在和溶解后的渾濁表現(xiàn)出來。

2. 不建議制備濃縮培養(yǎng)基。在濃縮培養(yǎng)基中，溶解性較差的游離堿性氨基酸和鹽復(fù)合物含量可能發(fā)生沉淀。

3. 制備好的培養(yǎng)基的pH值和*濃度是影響細(xì)胞生長的關(guān)鍵因素。這也受培養(yǎng)基的量和培養(yǎng)容器體積(表面體積比)的影響。例如在大瓶如Roux瓶中，隨著相當(dāng)體積的CO2釋放，pH值會明顯上升。因此，對于每種細(xì)胞類型，必須確定pH值、*濃度、表面體積比的條件。我們建議嚴(yán)格監(jiān)測pH值。如果需要，可用無菌的1N HCl或1N NaOH或充二氧化碳來調(diào)pH值。

4. 如需要，可在過濾除菌前或除菌后在培養(yǎng)基中補(bǔ)充添加劑，注意無菌防護(hù)措施。培養(yǎng)基的保質(zhì)期將取決于加入培養(yǎng)基中的添加劑的性質(zhì)。