CAPS緩沖液(0.2mol/L,pH11.0) 優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
產(chǎn)品名稱： CAPS緩沖液(0.2mol/L,pH11.0)
規(guī)格：500ml
用途：纖連蛋白的純化
注意事項：主要由CAPS、去離子水組成,調(diào)pH值至11.0,避免接觸空氣。
儲存條件：室溫,12個月
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CAPS緩沖液 優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
高能鍵:在標準條件下水解時釋放的自由能大于30.5KJ/mol的化學(xué)鍵稱為高能鍵,常表示為‘‘~”。
ATP的生成方式:底物水平磷酸化和氧化磷酸化
底物水平磷酸化:在分解代謝過程中,底物因脫氫、脫水等作用而使能量在分子內(nèi)部重新分布,生成高能磷酸化合物,然后將高能基團轉(zhuǎn)移給ADP生成ATP 的過程。
氧化磷酸化:在生物氧化過程中,代謝物脫下的氫/電子經(jīng)呼吸鏈氧化生成水時,釋放的能量能夠偶聯(lián)ADP磷酸化,生成ATP,又稱為偶聯(lián)磷酸化。(是體內(nèi)主要的產(chǎn)能方式)
氧化磷酸化偶聯(lián)部位:復(fù)合體Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ 推測偶聯(lián)部位的依據(jù):
①磷/氧比值:每消耗1摩爾氧原子所消耗的無機磷摩爾數(shù),即:合成ATP的摩爾數(shù)。第壹個部位在NADH和Q之間,第二個在Q和Cyt c之間,第三個在Cyt c 和½O2之間
②自由能變化:三個階段分別為0.27V、0.22V、0.53V→52.1、40.5、102、3KJ/mol
氧化磷酸化偶聯(lián)機制:化學(xué)滲透理論:電子經(jīng)呼吸鏈傳遞時,可將質(zhì)子(H+)從線粒體內(nèi)膜的基質(zhì)側(cè)泵到內(nèi)膜胞漿側(cè),產(chǎn)生膜內(nèi)外質(zhì)子電化學(xué)梯度,儲存能量。當(dāng)質(zhì)子順濃度梯度回流時驅(qū)動ADP與Pi生成ATP。 ATP合酶包括F0和F1兩部分。H+順梯度經(jīng)過F回到基質(zhì)時將能量提供給F1,F1利用離子轉(zhuǎn)移的能量合成ATP 影響氧化磷酸化的因素:
①抑制劑:(1)呼吸鏈抑制劑:阻斷呼吸鏈中某些部位電子傳遞(2)解偶聯(lián)劑:使氧化與磷酸化偶聯(lián)過程脫離。如:二硝基*,解偶聯(lián)蛋白(3)氧化磷酸化抑制劑:對電子傳遞及ADP磷酸化均有抑制作用。如:寡霉素
②ADP的調(diào)節(jié)作用:氧化磷酸化的速度主要受ADP的調(diào)節(jié)。
③甲狀腺激素:甲狀腺激素可誘導(dǎo)細胞膜上Na+,K+–ATP酶的合成,亦可促進解偶聯(lián)蛋白基因表達。
④線粒體DNA突變:突變直接影響氧化磷酸化過程,使ATP生成減少、細胞功能下降而致病。
19.肌肉和腦組織中,ATP將高能磷酸轉(zhuǎn)移給肌酸生成磷酸肌酸,磷酸肌酸是ATP 的儲存形式。
胞漿中NADH必須經(jīng)一定轉(zhuǎn)運機制進入線粒體,再經(jīng)呼吸鏈進行氧化磷酸化其進入呼吸鏈的兩種機制:3-磷酸甘油穿梭,終生成2個ATP。蘋果酸-天冬氨酸穿梭,經(jīng)NADH呼吸鏈生成3個ATP。
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