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核型多角體病毒

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核型多角體病毒 運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。

詳細(xì)信息 在線詢價

詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱:核型多角體病毒
英文名稱:Nuclear Polyhedrosis Virus(NPV)PCR
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
普通PCR反應(yīng)流程:

 

實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

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技術(shù)參數(shù):
1. 符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 1686-2005《新城疫病毒中強毒株檢測方法:熒光RT-PCR法》的檢測要求,可用于禽肉、禽類組織臟器、禽類排泄和分泌物,及其泄殖腔和咽喉拭樣中新城疫病毒的檢測。
2. 靈敏度:對于接種的雞胚尿囊液,檢測的zui高稀釋度可達10-8~10-7,與雞胚病毒分離方法的靈敏度接近。定量檢測線性范圍可達10-1010拷貝/ml。
3. 特異性:采用基因序列數(shù)據(jù)庫設(shè)計,并通過系統(tǒng)驗證,新城疫病毒RT-PCR能夠檢測所有已知新城疫病毒毒株。對于其它禽類感染因子,本試劑盒檢測結(jié)果為陰性。
4. 產(chǎn)品盒組成:(不包括新城疫病毒RNA提取試劑,用戶可采用通用型病毒RNA提取試劑盒或試劑盒*的提取方法。) 組成成份(48T/kit) 規(guī)格 數(shù)量  RNA提取液 30ml 1瓶 DEPC水 5 ml 1瓶 新城疫病毒RT-PCR一步法反應(yīng)液 920ul 1管 逆轉(zhuǎn)錄酶(5U/ul) 48ul 1管 Taq HS酶(5U/ul) 24ul 1管 新城疫病毒陽性對照 100ul 1管新城疫病毒陰性對照 100ul 1管 使用說明書 一份。


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