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FluorCam開放式葉綠素熒光成像系統(tǒng)

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FluorCam開放式葉綠素熒光成像系統(tǒng)

FluorCam開放式葉綠素熒光成像系統(tǒng)是一款高度靈活、應(yīng)用廣泛的植物生理生態(tài)研究儀器,系統(tǒng)采用模塊化結(jié)構(gòu),有四個LEDs光源版、CCD鏡頭、支架、控制單元及FluorCam成像分析軟件等組成。1.jpg兩對LEDs光源版提供測量光、光化學(xué)光和飽和光閃,角度和高度可調(diào);CCD鏡頭高度可調(diào),且可靈活配置PSI特制高靈敏度CCD鏡頭或高分辨率鏡頭,還可裝配第五個光源版于鏡頭周邊。標準配置(標準版)的大成像面積為13×13 cm,大型版大成像面積達20×20 cm。既可對單個葉片進行葉綠素熒光成像,還可對整株植物進行葉綠素熒光成像,廣泛應(yīng)用于植物光合生理生態(tài)、植物逆境脅迫生理與易感性、氣孔功能、植物環(huán)境如土壤重金屬污染響應(yīng)與生物監(jiān)測、植物抗性、作物育種等研究。

應(yīng)用領(lǐng)域:

· 植物光合特性和代謝紊亂篩選

· 生物和非生物脅迫的檢測

· 植物抗脅迫能力或者易感性研究

· 氣孔非均一性研究

· 代謝混亂研究

· 長勢與產(chǎn)量評估

· 植物——微生物交互作用研究

· 植物——原生動物交互作用研究

功能特點:

§ 模塊化,配置靈活,可自由安裝更換光源板、自由調(diào)整光源角度和高度、自由調(diào)整CCD鏡頭高度,方便被測植物的處理、操作等

§ 可自由選配不同波長LEDs光源板,如選配青色光源板用于氣孔功能研究、選配紫外光源板用于多色熒光成像試驗測量等

§ 成像面積大,大型版成像面積達20×20cm,可對整株植物甚至多株植物(如擬南芥等小型植物)進行實驗成像分析

§ 高靈敏度CCD鏡頭,時間分辨率達50張每秒,快速捕捉葉綠素熒光瞬變

§ 可進行自動重復(fù)成像測量,可設(shè)置一個實驗程序(Protocols)自動循環(huán)成像測量,成像測量數(shù)據(jù)自動按時間日期存入計算機(帶時間戳)

§ 帶有Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)、熒光淬滅分析等各種通用實驗程序(protocols),測量分析參數(shù)達50多個

§ 可選配TetraCam彩色成像模塊,大成像面積20×25cm,用于葉片或植物形態(tài)測量分析

§ 測量樣品包括葉片、花卉、果實、植物其它組織及整株植物、藻類等

技術(shù)參數(shù):

§ 成像面積:標準版成像面積達13×13cm,大型版成像面積達20×20cm,可對植物葉片、植物組織、藻類、苔蘚、地衣、整株植物或多株植物、96孔板、384孔板等進行成像分析

§ 測量參數(shù):Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm', Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qL, QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多個葉綠素熒光參數(shù),每個參數(shù)均可顯示2維熒光彩色圖像

2.jpg

· 具備完備的自動測量程序(protocol),可自由對自動測量程序進行編輯

a) Fv/Fm:測量參數(shù)包括Fo,F(xiàn)m,F(xiàn)v,QY等

b) Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng):Fo,F(xiàn)p,F(xiàn)v,F(xiàn)t_Lss,QY,Rfd等熒光參數(shù)

c) 熒光淬滅分析:Fo,F(xiàn)m,F(xiàn)p,F(xiàn)s,F(xiàn)v,QY,ΦII,NPQ,Qp,Rfd,qL等50多個參數(shù)

d) 光響應(yīng)曲線LC:Fo,F(xiàn)m,QY,QY_Ln,ETR等熒光參數(shù)

e) PAR吸收與NDVI(選配)

f) GFP等靜態(tài)熒光成像測量(選配)

  • 高靈敏度TOMI-1 CCD傳感器:

a) 圖像分辨率:720×560像素

b) 時間分辨率:每秒50幀

c) A/D 轉(zhuǎn)換分辨率:12位(4096灰度色階)

d) 像元尺寸:8.6µm×8.3µm

e) 通訊模式:千兆以太網(wǎng)

§ 高分辨率TOMI-2 CCD傳感器(選配)

a) 逐行掃描CCD

b) 圖像分辨率:1360×1024像素

c) 時間分辨率:在圖像分辨率下可達每秒20幀

d) A/D 轉(zhuǎn)換分辨率:16位(65536灰度色階)

e) 像元尺寸:6.45µm×6.45µm

f) 運行模式:1)動態(tài)視頻模式,用于葉綠素熒光參數(shù)測量;2)快照模式,用于GFP等熒光蛋白和熒光染料測量

g) 通訊模式:千兆以太網(wǎng)

§ 3.jpg光源板:4塊大型高強度封裝LED光源板,每個光源板由8×9 LEDs陣列,光源板有效面積與成像面積相同,標準版13×13cm,大型版20×20cm

§ 測量光:標配617nm紅光,其它波段可選,持續(xù)時間10µs–100µs可調(diào)

§ 雙色光化光:標配為2紅光(617nm)+2白光,可選配2紅光(617nm)+2藍光(470nm)或其它波長光源組合, Actinic1大光強300µmol(photons)/m2.s,Actinic2大光強2000µmol(photons)/m2.s;大光化學(xué)光可升級至3000µmol(photons)/m2.s

§ 飽和光閃:大光強4000µmol(photons)/m2.s,可升級至6000 µmol(photons)/m2.s

§ PAR吸收測量模塊(選配):遠紅光740nm(FAR)、660nm雙色LEDs光源板與7位濾波輪及濾波片,用于測量PAR吸收及NDVI

§ GFP測量模塊(選配):藍色光化光源與7位濾波輪及濾波片,用于測量GFP(綠色熒光蛋白)

§ 7位濾波輪(選配):加裝不同波段濾波片,配合選配的光源板測量PAR吸收和GFP、YFP等穩(wěn)態(tài)熒光

§ 紫外LED光源板(選配):365nm或385nm,1)測量多色熒光(詳見FluorCam多光譜熒光成像系統(tǒng));2)測量wtGFP(野生型綠色熒光蛋白)、DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚,一種熒光染料)

§ 藍色LED光源板(選配):470nm,1)測量EGFP(增強型綠色熒光蛋白);2)用于氣孔功能研究

§ 綠色LED光源板(選配):530nm,測量YFP(黃色熒光蛋白)

§ 其他可選配光源板:品藍(447 nm),青色(505 nm),紅色(627 nm),深紅(655 nm),琥珀色(590 nm),遠紅(740nm)等

*測量wtGFP、DAPI、EGFP、YFP等熒光蛋白或熒光染料還需要選配7位濾波輪,高分辨率CCD及相應(yīng)濾波片

4.jpg

§ FluorCam葉綠素熒光成像分析軟件功能:具Live(實況測試)、Protocols(實驗程序選擇定制)、Pre–processing(成像預(yù)處理)、Result(成像分析結(jié)果)等功能菜單

§ 客戶定制實驗程序協(xié)議(protocols):可設(shè)定時間(如測量光持續(xù)時間、光化學(xué)光持續(xù)時間、測量時間等)、光強(如不同光質(zhì)光化學(xué)光強度、飽和光閃強度、調(diào)制測量光等),具備實驗程序語言和腳本,用戶也可利用Protocol菜單中的向?qū)С绦蚰0孀杂蓜?chuàng)建新的實驗程序

§ 自動測量分析功能:可設(shè)置一個實驗程序(Protocol)自動無人值守循環(huán)成像測量,重復(fù)次數(shù)及間隔時間客戶自定義,成像測量數(shù)據(jù)自動按時間日期存入計算機(帶時間戳)

§ 快照(snapshot)模式:通過快照成像模式,可以自由調(diào)節(jié)光強、快門時間及靈敏度得到清晰突出的植物樣本穩(wěn)態(tài)熒光和瞬時熒光圖片

§ 成像預(yù)處理:程序軟件可自動識別多個植物樣品或多個區(qū)域,也可手動選擇區(qū)域(Region of interest,ROI)。手動選區(qū)的形狀可以是方形、圓形、任意多邊形或扇形。軟件可自動測量分析每個樣品和選定區(qū)域的熒光動力學(xué)曲線及相應(yīng)參數(shù),樣品或區(qū)域數(shù)量不受限制(>1000)

§ 數(shù)據(jù)分析模式:具備“信號計算再平均”模式(算數(shù)平均值)和“信號平均再計算”模式,在高信噪比的情況下選用“信號計算再平均”模式,在低信噪比的情況下選擇“信號平均再計算”模式以過濾掉噪音帶來的誤差

5.jpg6.jpg

§ 輸出結(jié)果:高時間解析度熒光動態(tài)圖、熒光動態(tài)變化視頻、熒光參數(shù)Excel文件、直方圖、不同參數(shù)成像圖、不同ROI的熒光參數(shù)列表等

§ 給光制度:靜態(tài)或動態(tài)(竇式)

§ CCD檢測范圍:400–1000nm

§ 光譜響應(yīng):540nm處量子效率(70 %),400nm和650nm處轉(zhuǎn)降50%

§ 讀出噪音:低于12eRMS,典型10e

§ 滿阱容量:大于70,000 e (unbinned)

§ Bios固件可升級

§ 通訊方式:千兆以太網(wǎng)

§ 供電電壓:90–240V

典型應(yīng)用:

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干旱、高溫等各種環(huán)境脅迫研究

葉綠素熒光作為應(yīng)用的無損光合探針,可以靈敏地反應(yīng)植物在各種環(huán)境脅迫下的變化。上圖為玉米在不同模擬干旱條件下的葉綠素熒光成像圖(Katarzyna,2015)。

植物病害/蟲害:

葉綠素熒光成像技術(shù)同樣可以用于各種生物脅迫研究,尤其是脅迫早期篩查。上圖為煙草感染真菌后的各種葉綠素熒光成像,從而對病害和植株抗性進行定量分析(Tung,2013)。

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農(nóng)藥等化學(xué)毒害:

FluorCam葉綠素熒光成像技術(shù)可以實現(xiàn)無人值守的監(jiān)測測量。上圖為菜豆對敵草隆吸收過程中的葉綠素熒光成像,可見毒害隨葉脈的發(fā)展過程(Hartmut,2013)。

果實脅迫研究:

FluorCam葉綠素熒光成像技術(shù)突破了傳統(tǒng)葉綠素熒光技術(shù)只能測量葉片的限制,可以對幾乎各種植物樣品進行測量。上圖為檸檬被熱水傷害后的葉綠素熒光成像(David,2005)。這一技術(shù)同樣可用于棉鈴的抗逆研究。

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抗性作物育種:

葉綠素熒光成像技術(shù)可以直觀地比較不同品種的抗性差異。在篩選對除草劑抗性強的玉米品種與基因型時,FluorCam葉綠素熒光成像可以直觀并且定量地反映其抗性及產(chǎn)生毒害部位的差異(Kopsell,2011)。同時,FluorCam具備的GFP等熒光蛋白成像功能,可直接應(yīng)用于分子育種。

植物表型研究:

葉綠素熒光成像技術(shù)是植物表型及表型組學(xué)重要的研究技術(shù)。通過FluorCam葉綠素熒光成像技術(shù)可以獲取植物表型相關(guān)的海量數(shù)據(jù)并構(gòu)建表型數(shù)據(jù)庫(Céline,2015)。

產(chǎn)地:歐洲



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