1、原理及適用范圍
大腸桿菌（Escherichia coli）和大腸菌群（Coliform）都是存在于溫血動物腸道和糞便的細(xì)菌，是條件性致病菌，主要造成水體污染，也可能引起食物中毒的發(fā)生。大腸桿菌大腸菌群測試片（FilmplateTM E.coli&coliform count plate BE203）是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，可以同時檢測大腸桿菌和大腸菌群，含有大腸菌選擇性培養(yǎng)基、冷水可溶性的吸水凝膠和半乳糖苷酶（GAL）和葡萄糖醛酸酶（GUD）指示劑。大腸桿菌顯藍(lán)色，其他大腸菌群顯紅色，藍(lán)點(diǎn)加上紅點(diǎn)為總的大腸菌群數(shù)。 本產(chǎn)品適合于食品及原料中大腸菌群的計數(shù)，如消毒牛乳、冷飲和調(diào)味品等樣品的檢測，也可用于表面的衛(wèi)生檢測。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸桿菌計數(shù)——PetrifilmTM 測試片法（GB/T 4789.38—2008）。
2、操作方法
2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的樣品勻液，依次往下稀釋。
2.2、接種：一般食品選1～2個稀釋度進(jìn)行檢測，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測。將大腸桿菌大腸菌群測試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固，每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。
3、結(jié)果判讀
培養(yǎng)后大腸桿菌顯藍(lán)色，其他大腸菌群顯紅色，藍(lán)點(diǎn)加上紅點(diǎn)為總大腸菌群數(shù)。
4、計數(shù)原則及報告方式
4.1、選擇菌落數(shù)在15～150個之間的紙片進(jìn)行計數(shù)。
4.2、若兩個稀釋度的菌落數(shù)均在15～150之間，則取其平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為每毫升（或每克）樣品中的大腸菌群菌落形成單位數(shù)；
4.3、如果所有稀釋度的測試片上的菌落數(shù)都小于15，則計數(shù)稀釋度zui低的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之；如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長，則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)報告之；
4.4、如果所有稀釋度的菌落數(shù)都大于150，計數(shù)zui高稀釋度的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。計數(shù)菌落數(shù)大于150的測試片時，也可計數(shù)一個或兩個具有代表性的方格內(nèi)的菌落數(shù)，換算成單個方格內(nèi)的菌落數(shù)后乘以20（濾紙區(qū)面積為20cm2），即為測試片上估算的菌落數(shù)。報告單位以CFU/mL（或CFU/g）表示。
5、附加說明
5.1、樣品勻液的pH值應(yīng)在6.5～7.5之間，必要時用1mol/L氫氧化鈉（NaOH）或1mol/L鹽酸（HCl）調(diào)節(jié)pH。
5.2、我國的食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)大多都以大腸菌群（Coliform）作為檢測指標(biāo)，而歐盟等許多國家則以大腸桿菌（E.coli）作為檢測對象，因此，本產(chǎn)品對于出口食品和航空配餐等企業(yè)具有更廣泛的應(yīng)用前景。
6、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，在拆封前將整包回溫至室溫。
