糖酵解系列果糖1,6二磷酸醛縮酶(FBA)測試盒
產(chǎn)品規(guī)格 : 100T/96S
測試方法:微量法
產(chǎn)品分類:糖酵解系列
產(chǎn)品品牌:mlBio/酶聯(lián)生物
產(chǎn)品包裝:液體盒裝
運輸條件:快遞包郵
應(yīng)用范圍:僅供科研研究使用
保存條件:低溫避光保存
有效期:6個月
說明書 : 咨詢或電詢客服索取
供應(yīng)商:上海酶聯(lián)生物科技有限公司
注 意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
糖酵解系列果糖1,6二磷酸醛縮酶(FBA)測試盒
測定意義:
植物葉綠體中果糖 1,6-二磷酸醛縮酶是光合作用中參與 calvin 循環(huán)的重要酶。催化果糖 1,6-二磷酸和景天庚酮糖 1,7-二磷酸的合成反應(yīng),在各種逆境脅迫下表現(xiàn)不同的響應(yīng)。
測定原理:
果糖 1,6-二磷酸醛縮酶催化果糖 1,6-二磷酸生成 3-磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮,在磷酸丙糖異構(gòu)酶和 α-磷酸甘油脫氫酶作用下催化NADH和磷酸二羥丙酮生成NAD和α-磷酸甘油,340nm 處吸光值的變化可反映果糖 1,6-二磷酸醛縮酶活性的高低。
自備實驗用品及儀器:
天平、震蕩儀、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板。
樣本的前處理:
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。