詳見說(shuō)明書
己糖激酶(HK)活性檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明:
HK(EC 2.7.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是葡萄糖分解過(guò)程中的第一個(gè)關(guān)鍵酶,催化葡萄糖轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點(diǎn)。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,NADPH 在340nm有特征吸收峰。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
注意事項(xiàng):
1. 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持 37℃,取小燒杯一只裝入一定量的 37℃蒸餾水,將此燒杯放入 37℃水浴鍋中。在反應(yīng)過(guò)程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
2. 最好兩個(gè)人同時(shí)做此實(shí)驗(yàn),一個(gè)人比色,一個(gè)人計(jì)時(shí),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
3. 不同勻漿組織中HK 活力不一樣,做正式試驗(yàn)之前請(qǐng)做1-2次預(yù)試驗(yàn),若ΔA>0.5,則說(shuō)明組織活力太高,必須用提取液稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清液,或縮短反應(yīng)時(shí)間至2min,使ΔA<0.5,以提高檢測(cè)靈敏度。注意同步修改計(jì)算公式。
己糖激酶(HK)活性檢測(cè)試劑盒相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0540/BC0545 丙酮酸激酶(PK)活性檢測(cè)試劑盒
BC0530/BC0535 磷酸果糖激酶(PFK)活性檢測(cè)試劑盒
BC2190/BC2195 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性檢測(cè)試劑盒