超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3-20.1kDa)常用溶液超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3-20.1kDa)常用溶液
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品包含3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成,分子量范圍為3. 3kD-20. 1kD。 可以用來判斷SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉,每種蛋白含量約為15-22.5μg,配有一支1×上樣緩沖液。
凝膠制備及染色注意事項(xiàng):
1. 先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,最后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時(shí),30v跑1-2小時(shí)后,待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時(shí),把電壓調(diào)至100v,至電泳結(jié)束,整個(gè)電泳過程大約需要6-8小時(shí)。
2. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會(huì)影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
3. 由于SDS-PAGE的圖譜上,蛋白質(zhì)對數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為15,000-200,000,因此對于分子量小于10000的蛋白質(zhì)或多肽的分子量,只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計(jì),推斷其是否落入預(yù)測的分子量范圍。
4. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時(shí)間不宜太長,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會(huì)消失。
5. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20分鐘,再進(jìn)行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時(shí)間不允許,也可不進(jìn)行固定直接染色。如果使用配方7進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性,請選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號:P1300),該產(chǎn)品具有染色快,無毒,靈敏性高等特點(diǎn),是常規(guī)染色液的替代品。
相關(guān)產(chǎn)品:
P1015 4×蛋白上樣緩沖液(含DTT)
P1016 4×蛋白上樣緩沖液(含β-巰基乙醇)
A1030 10%過硫酸氨
T1070 5×Tris-苷氨酸電泳緩沖液
P1300 考馬斯亮藍(lán)快速染色