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Flex-Bio生物型原子力顯微鏡

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  • 公司名稱 上海納嘉儀器有限公司
  • 品牌
  • 型號(hào)
  • 所在地 上海
  • 廠商性質(zhì) 其他
  • 更新時(shí)間 2024/6/11 14:28:02
  • 訪問次數(shù) 92

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NanosurfFlex-Bio生物型原子力顯微鏡結(jié)合多功能和高性能的生命科學(xué)用AFM生命科學(xué)研究的一個(gè)關(guān)鍵成功因素是融合多種分析技術(shù)

詳細(xì)信息 在線詢價(jià)

Nanosurf Flex-Bio生物型原子力顯微鏡

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結(jié)合多功能和高性能的生命科學(xué)用AFM

生命科學(xué)研究的一個(gè)關(guān)鍵成功因素是融合多種分析技術(shù)。使用Nanosurf的Flex-Bio,您可以將此系統(tǒng)的液體AFM成像、光譜學(xué)和納米操作能力與倒置顯微鏡的光學(xué)技術(shù)結(jié)合起來。

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生命科學(xué)研究的超靈活系統(tǒng)設(shè)計(jì)

Flex-Bio配備了手動(dòng)和電動(dòng)移動(dòng)臺(tái),可以在蔡司、奧林巴斯、尼康和徠卡倒置顯微鏡上或獨(dú)立平臺(tái)上無縫集成。在倒置顯微鏡下,光學(xué)和AFM數(shù)據(jù)可以相互關(guān)聯(lián),如圖所示為人類視網(wǎng)膜內(nèi)界膜(ILM)。

flex-bio-combined-imaging-collag.jpg

(A)生理緩沖液中分離的ILM的明視野圖像。(B)顯示抗層粘連蛋白染色的相同切片的熒光圖像。(C)ILM截圖的AFM形貌圖;也在B中顯示為疊加的方塊截圖.(D)相同截圖的AFM剛度分布。每個(gè)點(diǎn)的顏色表示由在各個(gè)位置記錄的力曲線計(jì)算的局部剛度值。 (E)D中所示的剛度數(shù)據(jù)的直方圖。(F)在ILM和玻璃基板上獲得的典型的力-位移曲線。這些曲線將轉(zhuǎn)換為力 - 壓痕數(shù)據(jù),然后可以計(jì)算剛度。生物組織的剛度分布已被證明是諸如年齡相關(guān)性黃斑變性、關(guān)節(jié)炎和癌癥等疾病的標(biāo)志物。數(shù)據(jù)提供:Marko Loparic,Marija Plodinec,Philip Oertle和Paul B. Henrich,Biozentrum / SNI / UHBS,瑞士巴塞爾大學(xué)

模塊化平臺(tái),懸臂基座和相應(yīng)軟件的概念讓系統(tǒng)可以輕松升級(jí),以獲得生命科學(xué)和材料研究中的許多新可能性。 比如Flex-FPM 用于細(xì)胞和納米操作,F(xiàn)lex-ANA用于自動(dòng)納米力學(xué)分析。此外,最初為Flex-Axiom系統(tǒng)開發(fā)的高級(jí)模式,如MFM和KPFM,也可用于Flex-Bio。對(duì)于不需要從下方進(jìn)行光學(xué)訪問的測(cè)量,例如對(duì)于像細(xì)菌視紫紅質(zhì)這樣的樣品的成像和光譜,使用一個(gè)獨(dú)立移動(dòng)臺(tái)兼容于Flex-Bio和Nanosurf Isostage隔振臺(tái)和AE300隔聲罩,則系統(tǒng)通常更加緊湊好用。

flex-bio-axiom-upgrade-applicati.jpg

(A)一個(gè)帶有獨(dú)立移動(dòng)臺(tái),隔振臺(tái)和隔聲罩的Flex-Bio系統(tǒng)。(B)2D細(xì)菌視紫紅質(zhì)晶體[140 nm 掃描范圍]。 (C)B的功率譜,顯示出遠(yuǎn)超過1nm的橫向分辨率[虛線圓圈]。(D)細(xì)菌視紫紅質(zhì)晶體的單分子力譜。


在日常使用中真正重要的實(shí)用細(xì)節(jié)

帶有對(duì)齊結(jié)構(gòu)的懸臂基座可與包含對(duì)齊槽的懸臂一起使用。這提供了微米級(jí)重定位精度,避免了激光對(duì)準(zhǔn),并允許您一次又一次地找到相同的樣本特征。懸臂從上到下進(jìn)入圖像,因此無論您是通過眼睛,CCD相機(jī)還是AFM(以默認(rèn)掃描角度掃描),樣品方向始終相同。











對(duì)準(zhǔn)芯片技術(shù)







獨(dú)立移動(dòng)臺(tái)的頂視圖










倒置顯微鏡的頂視圖, 圖片提供: O. Guilaume-Gentil, 瑞士蘇黎世聯(lián)邦理工學(xué)院


Flex-Bio 成像模式

以下描述為儀器所具備的模式。某些模式可能需要其他組件或軟件選項(xiàng)。詳情請(qǐng)瀏覽宣傳冊(cè)或直接聯(lián)系我們。

標(biāo)準(zhǔn)成像模式

靜態(tài)力模式
橫向力模式
動(dòng)態(tài)力模式 (輕敲模式)
相成像模式


熱成像模式

熱掃描顯微 (SThM)
 


磁性能

磁力顯微


電性能

導(dǎo)電探針 AFM (C-AFM)
壓電力顯微 (PFM)
靜電力顯微 (EFM)
開爾文探針力顯微鏡(KPFM)
掃描擴(kuò)散電阻顯微 (SSRM)
 


機(jī)械性能

力調(diào)制

剛度和模量
力譜
力映射


其他機(jī)械模式

刻蝕和納米操作
電化學(xué) AFM (EC-AFM)




Flex-Bio 應(yīng)用示例

I型膠原纖維的成像

膠原蛋白是哺乳動(dòng)物中含量的蛋白質(zhì),占全身蛋白質(zhì)含量的25%以上。它是結(jié)締組織細(xì)胞外基質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)蛋白,為肌腱和骨骼提供抗拉強(qiáng)度。在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)膠原蛋白是纖維狀的I型膠原蛋白。I型膠原纖維顯示典型的周期性形態(tài),即所謂的D-帶。D-帶是由各個(gè)膠原分子的交錯(cuò)自組裝形成較大的原纖維,周期為約67nm。 來自ETHZürich的Snedeker教授的研究小組記錄了來自大鼠肌腱的膠原纖維的圖像。Snedeker教授的研究領(lǐng)域之一是肌腱力學(xué)和生物學(xué)














幾種I型膠原纖維的3D AFM形貌














I型膠原纖維的AFM形貌圖














與地形圖像一起記錄的 AFM 偏轉(zhuǎn)圖像。


AFM形貌3D圖很好地顯示了所有原纖維上I型膠原的典型周期性D帶。使用Nanosensors PPP-XYCONTR懸臂以靜態(tài)模式記錄膠原蛋白的形貌。AFM圖像處理采用的是Nanosurf報(bào)告軟件。膠原纖維的制備和成像由瑞士蘇黎世聯(lián)邦理工學(xué)院生物力學(xué)研究所的Uniklinik Balgrist的Snedeker教授研究小組的Massimo Bagnani進(jìn)行。



對(duì)活培養(yǎng)細(xì)胞的測(cè)量

力學(xué)生物學(xué)是一個(gè)新興的研究領(lǐng)域,涉及改變物理力或改變細(xì)胞和組織的力學(xué)特性的效果。一些疾病,例如纖維化和動(dòng)脈粥樣硬化與組織硬度的變化有關(guān)。此外,在癌癥中,癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛力取決于它們的彈性模量。
下圖使用了Nanosurf Flex-Bio系統(tǒng)和Flex-ANA軟件測(cè)量了人乳腺基底上皮細(xì)胞系活細(xì)胞的彈性模量。

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彈性模量分布

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來自力映射的未受干擾的細(xì)胞形貌

幅圖像顯示在浸入細(xì)胞培養(yǎng)基中的活乳腺上皮細(xì)胞上記錄的彈性模量(以kPa計(jì))??梢郧宄赜^察到細(xì)胞內(nèi)彈性模量的差異。細(xì)胞周圍的暗區(qū)源自更硬的細(xì)胞培養(yǎng)皿基質(zhì)。
第二幅圖像顯示了從力映射數(shù)據(jù)中提取的未受干擾的細(xì)胞形貌。根據(jù)每條力曲線的接觸點(diǎn)確定形貌,從而顯示零施加力下的細(xì)胞形貌。

映射到3D形貌的彈性模量

彈性模量分布


彈性模量數(shù)據(jù)映射到3D形貌,可以將兩個(gè)通道的信息關(guān)聯(lián)起來。使用Gwyddion軟件生成三維圖像。 

張圖顯示了從納米力學(xué)力映射實(shí)驗(yàn)中提取的彈性模量分布。模量較低時(shí)的峰值對(duì)應(yīng)于細(xì)胞的剛度。右邊的峰來自細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì),并顯示出高得多的彈性模量。

AFM 數(shù)據(jù)提供 Philipp Oertle, 巴塞爾大學(xué)生物學(xué)中心



細(xì)菌視紫紅質(zhì)的單分子力譜

下面的力-距離曲線報(bào)告了單個(gè)細(xì)菌視紫紅質(zhì)(BR)膜蛋白從其自然環(huán)境中(即鹽黃桿菌紫色膜)的受控C端的展開。

實(shí)線和虛線分別表示展開BR時(shí)觀察到的主展開峰和次展開峰對(duì)應(yīng)的WLC曲線。主展開峰的拉伸多肽的輪廓長(zhǎng)度用氨基酸(aa)表示。

br-unfolding-curves-300.jpg細(xì)菌視紫紅質(zhì)的單分子力譜

本實(shí)驗(yàn)使用了FlexAFM掃描頭(10-μm;版本3)結(jié)合C3000控制器和標(biāo)稱彈簧常數(shù)為0.1N / m的懸臂(Uniqprobe, qp-CONT, Nanosensors)記錄數(shù)據(jù)。

































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