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凝膠滲透色譜柱的使用壽命有限, 并且與其保養(yǎng)和使用狀況直接相關(guān)。
樣品和洗脫劑的污染、 頻繁的溶劑更換、 操作和儲(chǔ)存方法不當(dāng)以及溫度循環(huán)都會(huì)縮短色譜柱壽命。
那么問題來了,如何延長(zhǎng)凝膠色譜柱的使用壽命?
今天,小編就來教大家如何正確使用Waters Styragel GPC柱。
· Waters Styragel GPC柱
1、不要選擇色譜柱的排阻上限值比您希望保留分離的最大分子所需的排阻上限還要大的色譜柱。如果希望測(cè)量分子量廣泛分布時(shí),使用混合柱床(mixed-bed)或擴(kuò)展范圍(extended-range)色譜柱是恰當(dāng)?shù)倪x擇,這能夠?qū)λ蟹肿恿看笮√峁┮恢碌姆蛛x能力。
2、為獲得更好的分辨率和分子量測(cè)量準(zhǔn)確度,建議串聯(lián)2-3根高分辨率的窄分布色譜柱,可以同時(shí)兼顧寬分子量范圍和高分辨率。
3、為獲得最佳的分離度和最長(zhǎng)的色譜柱壽命,各色譜柱的流速不得超過1.0 mL/min或反壓超過3.5 MPa(500 psi,35 atm,以系統(tǒng)反壓作校正)。
4、對(duì)于溶劑高效色譜柱,為獲得最佳的分離度和最長(zhǎng)的色譜柱壽命,各色譜柱的流速不得超過0.3 mL/min或反壓超過3.5 MPa(500 psi,35 atm,以系統(tǒng)反壓作校正)。這些色譜柱的正常流速為0.3 mL/min。
5、避免GPC柱受到機(jī)械沖擊和振動(dòng)。
6、盡量避免GPC柱溫循環(huán)升降。
7、避免溶劑成分快速改變引起的反壓的快速改變。
8、當(dāng)轉(zhuǎn)換到不同粘度的溶劑體系時(shí),必須調(diào)整流速以確保系統(tǒng)的操作反壓不超過3.5MPa(500psi,35atm)每柱。
9、避免溶解在流動(dòng)相中的聚合物樣品重新沉淀。
10、總是使用高質(zhì)量的HPLC級(jí)溶劑。
11、GPC柱應(yīng)該固定于某類應(yīng)用,頻繁更換樣品和溶劑會(huì)縮短GPC柱的壽命,導(dǎo)致柱子分離度的降低。
12、串聯(lián)連接色譜柱的時(shí)候,使用內(nèi)徑0.009英寸(0.25mm)U-字型柱連接管附件次第連接每一根柱。
13、注意色譜柱系列的順序:
一般情況下,分析結(jié)果與色譜柱組的排列順序無關(guān)。但是,為了提高分離度并延長(zhǎng)色譜柱壽命,請(qǐng)按照孔徑依次減小的順序排列色譜柱,推薦的接法是使孔徑最大的色譜柱最靠近進(jìn)樣器。原因在于:
*孔徑越大的色譜柱越穩(wěn)定且越能夠耐受外來物質(zhì)的積累。
*樣品中分子量最大的物質(zhì)對(duì)樣品的粘度影響最大。如果先分離分子量最大的物質(zhì), 那么粘度的下降速度會(huì)更快, 色譜柱組的壓力將會(huì)更小。對(duì)于超高分子量的聚合物, 這種分離順序有利于減小樣品的剪切效應(yīng)。
關(guān)于GPC柱的保存
01
如果您打算在24小時(shí)內(nèi)再次使用色譜柱, 則無需進(jìn)行特殊的保存。但是,應(yīng)確保色譜柱不得變干。如果儲(chǔ)存時(shí)間較長(zhǎng),請(qǐng)將色譜柱放回其包裝盒中,并塞緊端塞進(jìn)行儲(chǔ)存。在沒有溶劑流動(dòng)的情況下,請(qǐng)勿將色譜柱置于高溫環(huán)境中。
02
為獲得最長(zhǎng)的色譜柱壽命, 應(yīng)避免溫度循環(huán)變化。色譜柱未使用時(shí), 應(yīng)維持在運(yùn)行溫度, 并將流速降低至0.1 mL/min。
03
要重啟色譜柱,將流速維持在0.1 mL/min,并且( 如果適用)在10小時(shí)內(nèi)將溫度逐漸升高。然后將流速設(shè)置為所需的操作流速。
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