液相色譜柱是液相色譜儀的核心部件,價格相對高昂,因此對其使用及維護應(yīng)尤其重視。
色譜柱的安裝
色譜柱在使用過程中避免強烈的碰撞和震動。各個廠家生產(chǎn)的色譜柱在接口尺寸上會有差異,如果柱頭類型和不銹鋼毛細管接頭兩者類型不匹配,將會產(chǎn)生漏液或者死體積過大的現(xiàn)象。接頭比柱頭深度長,不易擰緊而漏液;接頭比柱頭深度短,柱頭內(nèi)留有空隙而產(chǎn)生死體積,使譜帶展寬和峰拖尾。
色譜柱的使用
色譜柱平衡指的是用完整的分析程序,運行幾遍測試,等觀察到峰形、保留時間和峰面積穩(wěn)定為止,平衡即完成。另外,在使用緩沖鹽時,應(yīng)該先使用同等比例的水過渡,再將緩沖鹽引入色譜柱,以防止鹽析發(fā)生,從而損壞色譜柱。同理,使用緩沖鹽之后,一定要用較大比例的水相沖洗60min以上,將色譜柱中的緩沖鹽*沖洗干凈,防止鹽析。如果不使用緩沖鹽流動相,也需要沖洗,用大比例的有機相*沖洗柱內(nèi)的有機物,防止其沉積影響柱效或影響下一次實驗譜圖。
色譜柱的保存
最好遵守色譜柱說明書中的保持方式。在實際應(yīng)用中為了方便也可以如下使用:短期保持用所用的流動相保存為佳,這樣做可以減少下次使用的平衡時間。一般情況下,建議長期用80%甲醇或乙腈來保存反相柱。
純有機相保持有最大限度減少鍵合相水解的作用,但純甲醇(乙腈)又會將已水解而暫時吸附在柱內(nèi)的鍵合相洗脫出去,使固定相流失進程加快,縮短壽命;另外,純有機相保存時,溶劑易揮發(fā),導(dǎo)致柱床變干,也會容易損壞色譜柱。正相柱一般應(yīng)保持在所用流動相中。
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