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微生物鑒定藥敏分析儀的原理

   2022年03月29日 13:44  
  微生物鑒定藥敏分析儀是一種能快速進行微生物鑒定及其對藥物敏感性測試的儀器,用于鑒定各種病原菌,主要是革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、腸球菌屬及真菌等。
 
  全自動微生物鑒定和藥敏分析類儀器結(jié)合自動化、微機化和*的微生物檢驗方法,能夠?qū)εR床大多數(shù)細菌進行快速鑒定和藥敏實驗。
 
  細菌鑒定原理:采用傳統(tǒng)的比色法和快速熒光法。
 
  根據(jù)不同類別細菌的理化性質(zhì)不同,設(shè)計不同的測試卡,每一張卡包括多項生化反應(yīng)。儀器采用光電比色法測定細菌因分解底物導致PH值改變或由于細菌生長利用底物而引起的透光度變化;其熒光法是在測試卡的小孔中加入酶底物,使其與細菌產(chǎn)生的酶結(jié)合生成熒光物質(zhì)。儀器在較短的時間內(nèi)能夠分析細菌對不同生化底物所產(chǎn)生的發(fā)熒光的物質(zhì),通過讀數(shù)器測定熒光強度來判定細菌胞外酶;采用熒光技術(shù)鑒定細菌,速度可以提高4- 8倍。兩小時可提供鑒定報告。
 
  細菌鑒定實驗底物有幾種不同類型,各個不同品牌的儀器均使用自己的測試卡和相應(yīng)的試劑;以酶為基礎(chǔ)的反應(yīng)底物,包括顯色底物和熒光底物;以微生物生長為基礎(chǔ)的底物是糖類底物和化合物底物,還有混合底物;通過與各種細菌發(fā)生氧化、降解及水解反應(yīng),產(chǎn)生顏色的變化或產(chǎn)生熒光物質(zhì),利用顯色和熒光強度的變化,來鑒定細菌的菌型。儀器會自動選擇底物進行分析。
 
  藥敏試驗也有兩種測定法: 比濁法和熒光測定法。
 
  根據(jù)藥敏試驗的判讀標準,每一種藥物設(shè)計了多個稀釋梯度,每一種抗生素測定極小值抑菌濃度可用3- 8個測試孔不等,在卡中加入一定濃度的菌懸液;系統(tǒng)配有專用光電比濁儀,便于測定由不同細菌配置菌懸液的濃度。
 
  由于孔內(nèi)微生物生長會形成小顆?;蚓奂蓤F塊將引起濁度變化,儀器采用光電比濁法測定各個測試孔的濁度變化,每隔一定時間讀取數(shù)據(jù)一次,讀數(shù)器會測得不同的吸光度值,得以獲取待檢菌在不同濃度藥液及不同藥物中的生長率。
 
  抑菌濃度值(MIC) 極小值的測定是在含有各種濃度的抗生素的反應(yīng)卡中加入待測細菌的菌懸液,經(jīng)過一定時間孵育后,用光電比濁法測定其透光率,獲取吸光度值,若細菌生長,濁度增加,吸光度值增大,表示該孔內(nèi)的抗生素不能抑制細菌,反之表示細菌被抑制,以最小藥物濃度仍然能夠抑制細菌的反應(yīng)孔為該種抗生素對此菌的MIC值。
 
  用熒光技術(shù)測定時在肉湯中加入熒光底物,大部分菌種都能在5小時內(nèi)判讀MIC值,并根據(jù)相應(yīng)標準報告其藥物敏感結(jié)果( S、I、R) 。MIC卡每種藥物均有多個稀釋度。儀器在每一次讀取數(shù)值后,自動將所測取的數(shù)據(jù)與存儲在硬盤中的菌種資料庫標準菌生物模型相比較,由電腦分析得出的結(jié)果做出鑒定,可通過打印機打印報告。
 

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