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實驗目的
研磨破碎軟骨組織（大鼠膝關節(jié)軟骨），提取其總RNA。

實驗原理
充分磨碎軟骨樣品（大鼠膝關節(jié)軟骨），再用相關試劑提取其總RNA。

實驗材料和器具
樣品：大鼠膝關節(jié)軟骨
儀器：多樣品組織研磨儀
耗材：研磨罐，研磨珠
試劑：液氮若干

實驗步驟
1.研磨軟骨組織
1.1 取適量大鼠膝關節(jié)軟骨組織，剪切成約1立方厘米小塊；
1.2 將小塊軟骨組織置于液氮中2分鐘或放入-80度冰箱冷凍30分鐘；
1.3 將樣品和研磨珠放入研磨罐中，蓋好蓋子；
1.4 將裝好樣品及鋼珠的研磨管，放入已經(jīng)在-20度冰箱預冷好的適配器中，加入變性液，β-巰基乙醇；
1.5 將適配器放入凈信研磨儀中，在14單位頻振條件下，研磨1min，可得到勻漿狀的軟骨組織；
2.總RNA提取
2.1 冰水浴下，加酸性水飽和酚，搖勻，加醋酸鈉，氯fang、異戊醇混合液，冰水浴上15min；
2.2 4℃下，離心，取上清液，加氯fang、異戊醇混合液，離心取上清，加異丙醇，-20℃下沉淀，離心，得到凝膠狀RNA和蛋白多糖混合沉淀，加無RNA酶水，溶解得膠狀溶液；
2.3 取膠狀溶液用plant RNAout試劑盒的RNA提取步驟得到總RNA沉淀，取沉淀，乙醇洗滌后用無RNA酶水溶解沉淀，即得關節(jié)軟骨組織總RNA溶液。