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貓泛白細(xì)胞減少癥是貓細(xì)小病毒引起的貓的一種急性、致死性傳染病，乳發(fā)病貓死亡率最高，目前尚無治療藥物，需靠疫苗預(yù)防。李六金等研究了凍干貓泛白細(xì)胞減少癥弱毒疫苗的凍干工藝。將疫苗按表5-9配方配制，經(jīng)100℃恒溫處理10min, 冷卻到4～8℃，分裝1mL/瓶，然后進(jìn)行凍干。凍干工藝如圖5-6所示。

通過上述工藝制備的貓泛白細(xì)胞減少癥弱毒疫苗產(chǎn)品，為乳白色海綿狀疏松團(tuán)塊，易于脫壁，殘余含水量為3.0%～3.2%。加稀釋液后迅速溶解，溶解后呈淡粉紅色液體。經(jīng)檢測對比，凍干前后配苗毒液效價大致相同。肌肉注射給小白鼠和幼貓進(jìn)行安全檢驗，結(jié)果被試動物全部鍵活。

凍干技術(shù)也可以用作混合疫苗的制備。李六金等還研究了“犬四聯(lián)”弱毒疫苗的凍干。犬四聯(lián)疫苗的配制按表5-10配方完成。

毒液配制好后，與穩(wěn)定劑按1：1比例混合并分裝成2mL/瓶。分裝后的疫苗在LGJ型醫(yī)用冷凍干燥機(jī)中凍干。

產(chǎn)品進(jìn)箱后讓凍干箱降溫慢凍。預(yù)凍的溫度-40℃，到達(dá)預(yù)定的-40℃后再保持1.5h。預(yù)凍結(jié)束減壓，并在30min左右使真空度達(dá)到l0Pa，直至凍干結(jié)束為止。當(dāng)真空度達(dá)到10Pa之后開始加熱?？偟膬龈蓵r間為20h。凍干曲線見圖5-7。

凍干后的犬四聯(lián)疫苗產(chǎn)品呈微黃白色海綿狀疏松團(tuán)塊，易與瓶壁脫離。加稀釋液后迅速溶解成粉紅色澄清液體。經(jīng)檢測，凍干后疫苗效價滴度比凍干前降低約0.5～1.0個滴度，屬于正常范圍。

液體劑型的甲型肝炎減毒活疫苗在市場上已經(jīng)應(yīng)用多年，并取得了較好的免疫保護(hù)效果，但疫苗需低溫凍結(jié)保存，冷鏈運輸。凍干的甲肝減毒疫苗，可方便于儲運和使用。李光譜等研究了甲型肝炎減毒活疫苗的凍干。甲型肝炎病毒L-A-1株第23代，在人胚肺二倍體細(xì)胞ZBS株上大量培養(yǎng)后，分別制成純化苗（經(jīng)凍融、高速離心、PEG6000濃縮、氯仿抽提、Sephacryl S-400柱色譜等提純，PBS緩沖液稀釋，加適宜保護(hù)劑制成凍干疫苗)和未純化苗（經(jīng)凍融、超聲、過濾等，加適宜保護(hù)劑制成凍干疫苗）。疫苗在ALPHA1-6凍干機(jī)中凍干。-50℃預(yù)凍，-50～30℃抽真空干燥6h，-30～-20℃抽真空干燥9h，-20～-5℃抽真空干燥5h，-5～28℃抽真空干燥10h。

甲型肝炎病毒屬小RNA病毒，無脂蛋白包膜，一般不耐受冷凍干燥，解決無脂蛋白病毒冷凍干燥的問題需加入凍干保護(hù)劑。從實驗結(jié)果看出，不同保護(hù)劑配方對凍干甲型肝炎減毒活疫苗凍干前后的病毒滴度影響較大，以蔗糖、脂肪酸鹽(2%蔗糖、1%脂肪酸鹽)配方為主的保護(hù)劑，保護(hù)效果好，凍干前后疫苗病毒滴度下降均在1.0以內(nèi)，放置37℃ 1周下降0.5以內(nèi)，符合規(guī)程要求。

未純化疫苗中可能含有各種破壞性的酶（蛋白酶、脂肪酶等），凍干后37℃放置1周可能有一部分酶被激活，對病毒外殼結(jié)構(gòu)和核酸RNA有破壞作用，純化后無酶的影響，熱穩(wěn)定性較好。