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應(yīng)用濾袋技術(shù)測(cè)定中性洗滌纖維(NDF)的方法
ANKOM A200i型半自動(dòng)纖維分析儀
A. 試劑
(a)稱取30.0g十二烷基硫酸鈉(USP);18.61g 乙二胺四乙酸二鈉(Na2EDTA);6.81g四硼酸鈉(Na2B4O7)十水;4.56g*(Na2HPO4)-無水;10.0 ml三甘醇C6H14O4;全部溶解在1L水中,適當(dāng)?shù)臄嚢韬图訜嵊兄谌芙?。檢查適當(dāng)?shù)?/span>pH在6.9—7.1。
(b) α-*(Alpha-amylase) –熱穩(wěn)定細(xì)菌α-*:活性為17,400 單位/ mL。1個(gè)活性單位表示能將1 mg可溶性淀粉用30 min水解。
(c) 無水亞硫酸鈉(Na2SO3)。
(d) 丙酮:無色,并且蒸發(fā)后無殘?jiān)?/span>
B. 安全注意
(a) 丙酮易燃,操作時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,避免吸入或與皮膚接觸。將濾袋放入烘箱之前,要確保濾袋*干燥,丙酮*揮發(fā)。
(b) 十二烷基硫酸鈉對(duì)黏膜有刺激,因此操作時(shí)要帶防塵口罩和手套。
C.設(shè)備
(a) 消化裝置- ANKOM A200i 纖維分析儀。
(b) 濾袋- ANKOM F57濾袋。
(c) 封口機(jī)
(d) 干燥器
(e) 分析天平-至0.1mg
(f) 電熱干燥箱
(g) 耐溶劑記號(hào)筆
D. 步驟
(a) 濾袋和樣品的準(zhǔn)備
1) 用耐溶劑的記號(hào)筆給濾袋編號(hào),稱重(m 1)。
2) 直接準(zhǔn)確稱取
3) 在距離濾袋上邊緣大約
4) 至少取一個(gè)空白濾袋(C1),同時(shí)做空白測(cè)定。
5) 一次zui多可以在濾袋架上放24個(gè)濾袋。無論放置濾袋數(shù)量多少,9層濾袋架上托盤要全部使用,每層放三個(gè)濾袋。層與層之間錯(cuò)開120度。然后將裝有濾袋的支架放入纖維分析儀消煮器中,然后在頂部將金屬壓錘放上,以確保消煮過程中不浮起。
6) 樣品含有大豆產(chǎn)品或脂肪超過5% ,將裝有樣品的濾袋放入帶蓋玻璃容器中,加丙酮使濾袋*浸沒,蓋好蓋子。搖動(dòng)容器10次,浸泡10 min。然后更換新的丙酮,重復(fù)上述操作一次。zui后將濾袋取出,放在網(wǎng)篩上涼干。
例外:烘烤大豆,由于烘烤大豆的特殊性,需要采用改進(jìn)后的下面脫脂方法。將裝有樣品的濾袋放入帶蓋玻璃容器中,加丙酮使濾袋*浸沒,蓋好蓋子。搖動(dòng)容器10次,然后更換新的丙酮,浸泡12h。取出濾袋,放在網(wǎng)篩上涼干。
(b) 當(dāng)處理24個(gè)濾袋時(shí),向2000 mL中性洗滌劑溶液中加無水亞硫酸鈉
(c) 打開攪拌和加熱開關(guān),確保濾袋支架攪拌正常。蓋上蓋子并*密封好。 儀器將加熱并維持溶液溫度
(d) 消煮結(jié)束,關(guān)上加熱和攪拌開關(guān),打開排液閥(開始要慢一點(diǎn)),在打開蓋子之前確保廢液排放管與廢液容器安全連接,一定將熱的溶液排完。
*警示:消煮器中的溶液是有壓力的。 在打開蓋子之前一定將廢液閥打開以釋放壓力。
(e) 溶液排完后,打開蓋子,關(guān)閉排液閥,加2000 mL (
(f) zui后一次淋洗后,加冷的自來水以操作和使冷卻容器,為下輪測(cè)定做好準(zhǔn)備。排干水,從容器中取出帶濾袋的支架。將濾袋從濾袋支架上取下來,輕輕擠壓去掉多余的水。然后將濾袋放入250 mL 燒杯中,加丙酮至覆沒濾袋,浸泡3~5 min ,然后取出并輕輕擠壓去掉多余的丙酮。
(g) 在通風(fēng)櫥中展開濾袋,讓其自然干燥。*干燥后放入
*警告:在丙酮*揮發(fā)掉之前不能把濾袋放入烘箱中。
(q) 從烘箱中取出濾袋,直接放入干燥器中冷卻至室溫,然后稱重(m 2)。
E. 計(jì)算
試樣中中性洗滌纖維質(zhì)量分?jǐn)?shù)按以下公式計(jì)算。
NDF (%) = (m2- (m1 x C1)) x 100 / m
其中: m1 為空袋質(zhì)量,g;m為樣品質(zhì)量,g;m2 為提取處理后樣品殘?jiān)?/span>+濾袋質(zhì)量,g;C1 為空白袋子校正系數(shù)(烘干后質(zhì)量/原來質(zhì)量)。
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